ئۇنىۋېرسال ئاقسىل كېسەللىك ئالامەتلىرى ۋە كېسەللىك ئالامەتلىرى بولغان ئالزىمېر كېسەللىكىدىكى مېڭىنى ئاساس قىلغان چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى بىئولوگىيىلىك بەلگىسىنى ئاشكارىلايدۇ.

ئالزىمېر كېسەللىكى (AD) دە كۆپ خىل كېسەللىك قوزغاتقۇچنى ئەكس ئەتتۈرىدىغان ئاقسىل بىئولوگىيىلىك ماركا كەمچىل بولۇپ ، دىئاگنوز قويۇش ۋە داۋالاشنىڭ ئىلگىرىلىشىگە توسالغۇ بولىدۇ. بۇ يەردە ، بىز كەڭ دائىرىلىك ئاقسىل ئىشلىتىپ ، چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى (CSF) بىئولوگىيىلىك بەلگىنى ئېنىقلاپ ، AD پاتوفىزىئولوگىيىسىنىڭ كەڭ دائىرىسىنى ئىپادىلەيمىز. كۆپ ئىقتىدارلىق ماسسىلىق سپېكترومېتىرى ئايرىم-ئايرىم ھالدا AD CSF ۋە مېڭىدە تەخمىنەن 3500 ۋە تەخمىنەن 12000 ئاقسىلنى ئېنىقلاپ چىقتى. چوڭ مېڭە ئاقسىلىنىڭ تور ئانالىزى 44 خىل جانلىقلارنىڭ كۆپ خىللىقى مودۇلىنى ھەل قىلدى ، بۇنىڭ 15 سى چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى ئاقسىلى بىلەن قاپلانغان. بۇ قاپلاش مودۇلىدىكى CSF AD بەلگىسى بەش خىل ئاقسىل گۇرۇپپىسىغا بۆلۈنگەن بولۇپ ، ئوخشىمىغان كېسەللىك فىزىئولوگىيىلىك جەريانلىرىغا ۋەكىللىك قىلىدۇ. AD مېڭىسىدىكى سىناپس ۋە مېتابولىتلار ئازىيىدۇ ، ئەمما CSF كۆپىيىدۇ ، شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا چوڭ مېڭە ۋە CSF دىكى گىلال مول مېئېل ۋە ئىممۇنىتېت گۇرۇپپىسى كۆپىيىدۇ. گۇرۇپپا ئۆزگىرىشىنىڭ ئىزچىللىقى ۋە كېسەللىك ئالاھىدىلىكى 500 دىن ئارتۇق CSF ئەۋرىشكىسىدە ئىسپاتلاندى. بۇ گۇرۇپپىلار يەنە ئالامەتسىز AD دىكى بىئولوگىيىلىك گۇرۇپپىلارنى ئېنىقلاپ چىقتى. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ نەتىجىلەر AD دىكى كلىنىكىلىق قوللىنىشچان پروگراممىلارنى ئاساس قىلغان بىئولوگىيىلىك ماركا قورالىغا قارىتا ئۈمىدۋار بىر قەدەم.
ئالزىمېر كېسەللىكى دۇنيا مىقياسىدا ئەڭ كۆپ كۆرۈلىدىغان نېرۋا ئاجىزلاش خاراكتېرلىك دېۋەڭلىك كېسىلىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان سەۋەب بولۇپ ، ماس قەدەملىك تارقىلىش ، يەر شارى ئارقىلىق ئىممۇنىتېت كۈچى ۋە خوندىرىئوسوملۇق مېتابولىزم (1-3) قاتارلىق كۆپ خىل بىئولوگىيىلىك سىستېما ئىقتىدارىنىڭ ئاجىزلىشىشى بىلەن ئىپادىلىنىدۇ. قانداقلا بولمىسۇن ، ئۇنىڭ تەسىس قىلىنغان ئاقسىل بىئولوگىيىلىك بەلگىسى يەنىلا ئامىلوئىد ۋە تاۋ ئاقسىلىنى بايقاشقا ئەھمىيەت بېرىدۇ ، شۇڭا بۇ خىل كۆپ خىل كېسەللىك قوزغاتقۇچنى ئەكس ئەتتۈرەلمەيدۇ. چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى (CSF) دا ئەڭ ئىشەنچلىك ئۆلچەنگەن بۇ «يادرولۇق» ئاقسىل بىئولوگىيىلىك ماركا (i) ئامىلوئىد بىتا پېپتىد 1-42 (Aβ1-42) نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، بۇ پوستلاق قەۋىتىدىكى ئامىلوئىد تاختىسىنىڭ شەكىللىنىشىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ. (2) ئومۇمىي تاۋ ، ئاكون چېكىنىشنىڭ ئالامىتى . گەرچە بۇ چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى بىئولوگىيىلىك ماركا بەلگىسى بىزنىڭ «بەلگە قويۇلغان» AD ئاقسىل كېسەللىكلىرىنى بايقىشىمىزغا زور دەرىجىدە ياردەم بەرگەن بولسىمۇ ، ئەمما ئۇلار پەقەت كېسەللىكنىڭ ئارقىسىدىكى مۇرەككەپ بىئولوگىيەنىڭ ئاز بىر قىسمىغا ۋەكىللىك قىلىدۇ.
AD بىئولوگىيىلىك ماركا بەلگىسىنىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسىنىڭ كۆپ خىل بولماسلىقى نۇرغۇن خىرىسلارنى كەلتۈرۈپ چىقاردى ، مەسىلەن: (1) AD بىمارلىرىنىڭ بىئولوگىيىلىك گېروگېنتىنى پەرقلەندۈرەلمەسلىك ۋە مىقدارلاشتۇرالماسلىق ، (2) كېسەللىك ئېغىرلىقى ۋە ئىلگىرىلەشنىڭ يېتەرلىك بولماسلىقى ، بولۇپمۇ دەسلەپكى باسقۇچتا ، ۋە ( 3) نېرۋا خاراكتېرلىك ناچارلىشىشنىڭ ھەممە تەرەپلىرىنى تولۇق ھەل قىلالمىغان داۋالاش دورىلىرىنى تەرەققىي قىلدۇرۇش. بىزنىڭ مۇناسىۋەتلىك كېسەللىكلەردىن AD نى تەسۋىرلەشكە بەلگە خاراكتېرلىك پاتولوگىيىگە تايىنىشىمىز بۇ مەسىلىلەرنى تېخىمۇ ئېغىرلاشتۇرۇۋېتىدۇ. تېخىمۇ كۆپ پاكىتلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، دېۋەڭلىك كېسىلىگە گىرىپتار بولغان ياشانغانلارنىڭ كۆپىنچىسىدە بىلىشنىڭ تۆۋەنلىشىدە بىردىن كۆپ كېسەللىك ئالاھىدىلىكى بار (8). AD كېسەللىكى بار كىشىلەرنىڭ% 90 ياكى ئۇنىڭدىن كۆپرەكىدە يەنە قان تومۇر كېسەللىكلىرى ، TDP-43 قېتىشىش ياكى باشقا چېكىنىش خاراكتېرلىك كېسەللىكلەر بار (9). بۇ يۇقىرى نىسبەتتىكى پاتولوگىيىلىك قاپلىنىش بىزنىڭ دېۋەڭلىك كېسىلىگە دىئاگنوز قويۇش رامكىمىزنى قالايمىقانلاشتۇرۇۋەتتى ، كېسەللىكنى تېخىمۇ ئەتراپلىق پاتولوگىيەلىك ئېنىقلاشقا موھتاج.
ھەر خىل AD بىئولوگىيىلىك ماركا بەلگىسىنىڭ جىددىي ئېھتىياجىنى كۆزدە تۇتۇپ ، بۇ ساھە بىئولوگىيىلىك ماركا بايقاشنىڭ ئومۇمىي سىستېمىسىنى ئاساس قىلغان ھالدا «ئومىس» ئۇسۇلىنى قوللاندى. تېز سۈرئەتلىك دورا ھەمكارلىق (AMP) -AD بىرلەشمىسى 2014-يىلى يولغا قويۇلغان بولۇپ ، پروگراممىنىڭ ئالدىنقى سېپىدە. دۆلەتلىك ساغلاملىق تەتقىقات ئورنى ، ئاكادېمىك ۋە سانائەتنىڭ بۇ كۆپ تەرەپلىمىلىك تىرىشچانلىقى سىستېما ئاساسىدىكى ئىستراتېگىيەلەردىن پايدىلىنىپ ، مىلادىنىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسىنى تېخىمۇ ياخشى ئېنىقلاپ ، جانلىقلارنىڭ كۆپ خىللىقىغا دىئاگنوز قويۇش ۋە داۋالاش ئىستراتېگىيىسىنى تەرەققىي قىلدۇرۇشنى مەقسەت قىلىدۇ (10). بۇ تۈرنىڭ بىر قىسمى سۈپىتىدە ، تور ئاقسىلى AD دىكى سىستېما ئاساسىدىكى بىئولوگىيىلىك ماركىلارنى ئىلگىرى سۈرۈشتىكى ئۈمىدۋار قورالغا ئايلاندى. بۇ تەرەپسىز سانلىق مەلۇمات قوزغىتىش ئۇسۇلى مۇرەككەپ ئاقسىل سانلىق مەلۇماتلىرىنى گۇرۇپپىلارغا ياكى ئورتاق ھۈجەيرە تىپى ، ئورگانىك ۋە بىئولوگىيىلىك ئىقتىدارلار بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئورتاق ئىپادىلىنىدىغان ئاقسىلنىڭ «مودۇلى» غا تەشكىللەيدۇ (11-13). تەخمىنەن 12 ئۇچۇر مول تور ئاقسىل تەتقىقاتى AD مېڭىسىدە ئېلىپ بېرىلغان (13-23). ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ ئانالىزلار AD چوڭ مېڭە تورىدىكى ئاقسىلنىڭ مۇستەقىل گۇرۇپپىلار ۋە كۆپ خىل پوستلاق قەۋىتىدە يۇقىرى دەرىجىدە ساقلانغان مودۇللۇق تەشكىلاتنى ساقلايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. ئۇنىڭدىن باشقا ، بۇ مودۇللارنىڭ بەزىلىرى سانلىق مەلۇماتلار توپلىمىدىكى AD بىلەن مۇناسىۋەتلىك مولچىلىقنىڭ كۆپىيىشچانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، بۇ كۆپ خىل كېسەللىكلەرنىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ. يىغىپ ئېيتقاندا ، بۇ بايقاشلار AD تورىدا چوڭ مېڭىنىڭ ئاقسىلىنى بايقاشنى ئۈمىد قىلىدىغان لەڭگەر نۇقتىسىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
AD مېڭە تورى ئاقسىلىنى كلىنىكىلىق پايدىلىق سىستېما ئاساسىدىكى بىئولوگىيىلىك ماركا قىلىپ ئۆزگەرتىش ئۈچۈن ، بىز چوڭ مېڭە ھاسىل قىلغان تورنى AD CSF نىڭ ئاقسىل ئانالىزى بىلەن بىرلەشتۈردۇق. بۇ بىر گەۋدىلەشتۈرۈش ئۇسۇلى بەش خىل ئىستىقباللىق CSF بىئولوگىيىلىك ماركىنىڭ ئېنىقلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى ، بۇلار چوڭ مېڭىنى ئاساس قىلغان كېسەللىك قوزغاتقۇچ كېسەللىكلىرى بىلەن مۇناسىۋەتلىك ، مەسىلەن سىناپس ، قان تومۇر ، يىراقنى كۆرەلمەسلىك ، ياللۇغلىنىش ۋە مېتابولىزم يولىنىڭ نورمال بولماسلىقى قاتارلىقلار. بىز كۆپ خىل كۆپەيتىش ئانالىزلىرى ئارقىلىق بۇ بىئولوگىيىلىك ماركا تاختىسىنى مۇۋەپپەقىيەتلىك دەلىللىدۇق ، بۇنىڭ ئىچىدە ھەرخىل نېرۋا ئاجىزلاش كېسەللىكلىرىنىڭ 500 دىن ئارتۇق CSF ئەۋرىشكىسى بار. بۇ دەلىللەش ئانالىزلىرى كېسەللىك ئالامىتى بولمىغان AD (AsymAD) بىمارلىرىنىڭ CSF دىكى گۇرۇپپا نىشانىنى تەكشۈرۈش ياكى نورمال بىلىش مۇھىتىدا ئامىلوئىدنىڭ يىغىلىپ قالغانلىقىنىڭ ئىسپاتىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. بۇ ئانالىزلار AsymAD نوپۇسىدىكى كۆرۈنەرلىك بىئولوگىيىلىك ئوخشىماسلىقنى گەۋدىلەندۈرۈپ ، كېسەللىكنىڭ دەسلەپكى باسقۇچىدا شەخسلەرنى كىچىك تىپتا ياسىيالايدىغان تاختاي بەلگىسىنى ئېنىقلايدۇ. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ نەتىجىلەر AD دۇچ كەلگەن نۇرغۇن كلىنىكىلىق خىرىسلارنى مۇۋەپپەقىيەتلىك ھەل قىلالايدىغان كۆپ خىل سىستېمىلارنى ئاساس قىلغان ئاقسىل بىئولوگىيىلىك ماركا قوراللىرىنى تەرەققىي قىلدۇرۇشتىكى ئاچقۇچلۇق باسقۇچقا ۋەكىللىك قىلىدۇ.
بۇ تەتقىقاتنىڭ ئاساسلىق مەقسىتى AD نى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان ھەر خىل مېڭىنى ئاساس قىلغان كېسەللىك قوزغاتقۇچنى ئەكىس ئەتتۈرىدىغان يېڭى مېڭە سۇيۇقلۇقى بىئولوگىيىلىك بەلگىنى ئېنىقلاش. S1 رەسىمدە بىزنىڭ تەتقىقات مېتودولوگىيەمىز بايان قىلىنغان بولۇپ ، ئۇ: سۇيۇقلۇق. بايقاشنى ئاساس قىلغان تەتقىقات ئېمورىي گويزۇتا ئالزخايمېر كېسەللىكلەر تەتقىقات مەركىزى (ADRC) دىكى 20 بىلىشچان نورمال شەخس ۋە 20 AD بىمارلىرىدىكى CSF نىڭ پەرقلىق ئىپادىسىنى تەھلىل قىلىش بىلەن باشلانغان. AD غا دىئاگنوز قويۇش تۆۋەن دەرىجىدىكى Aβ1-42 ۋە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىدىكى ئومۇمىي تاۋ ۋە p-tau نىڭ يۇقىرى دەرىجىدىكى بىلىش توسالغۇغا ئۇچراش دەپ ئېنىقلىما بېرىلگەن. )]] (جەدۋەل S1A). كونترول قىلىش (MoCA نى كۆرسىتىدۇ ، 26.7 ± 2.2) نورمال CSF بىئولوگىيىلىك ماركا بار.
ئىنسانلارنىڭ CSF ھەرىكەتچان ئاقسىلنىڭ موللىقى بىلەن خاراكتېرلىنىدۇ ، ئۇنىڭدا ئالبۇممىن ۋە باشقا ئىنتايىن مول ئاقسىللار ئاقسىلنىڭ بايقىلىشىنىڭ ئالدىنى ئالالايدۇ (24). ئاقسىل بايقاشنىڭ چوڭقۇرلۇقىنى ئاشۇرۇش ئۈچۈن ، بىز كەڭ كۆلەمدە سپېكترومېتىرىيە (MS) ئانالىز قىلىشتىن ئىلگىرى ھەر بىر CSF ئەۋرىشكىسىدىن ئالدىنقى 14 مول مول ئاقسىلنى چىقىرىۋەتتۇق. MS تەرىپىدىن جەمئىي 39805 پېپتىد ئېنىقلانغان بولۇپ ، 40 ئەۋرىشكە 3691 ئاقسىلغا سىزىلغان. ئاقسىل مىقدارى كۆپ خىل ماسسىمان بەلگە (TMT) بەلگىسى ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلىدۇ (18 ، 25). يوقاپ كەتكەن سانلىق مەلۇماتلارنى ھەل قىلىش ئۈچۈن ، بىز كېيىنكى ئانالىزغا كەم دېگەندە% 50 ئەۋرىشكە تەركىبىدىكى ئاقسىلنىلا كىرگۈزدۇق ، شۇڭا ئاخىرىدا 2875 ئاقسىلنى مىقدارلاشتۇردۇق. ئاقسىلنىڭ ئومۇمىي مىقدارىدا كۆرۈنەرلىك پەرق بولغانلىقتىن ، كونترول ئەۋرىشكىسى ستاتىستىكىلىق سانلىق مەلۇمات دەپ قارىلىپ ، كېيىنكى ئانالىزغا كىرگۈزۈلمىگەن. قالغان 39 ئەۋرىشكىنىڭ موللىق قىممىتى ياش ، جىنس ۋە تۈركۈمگە ماس ھالدا تەڭشەلدى (13-15 ، 17 ، 18 ، 20 ، 26).
ستاتىستىكىلىق T سىناق ئانالىزىدىن پايدىلىنىپ ، چېكىنىش سانلىق مەلۇماتلىرى توپلىمىدىكى پەرقلىق ئىپادىنى باھالىدى ، بۇ ئانالىز كونترول ۋە AD دېلولىرى ئارىسىدىكى موللىق دەرىجىسى كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرگەن ئاقسىللارنى بايقىدى (جەدۋەل S2A). 1A رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، مىلادىيەدە جەمئىي 225 ئاقسىلنىڭ موللىقى كۆرۈنەرلىك ئازايغان ، 303 ئاقسىلنىڭ موللىقى كۆرۈنەرلىك ئاشقان. پەرقلىق ئىپادىلەنگەن بۇ ئاقسىللار ئىلگىرى ئېنىقلانغان بىر نەچچە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى AD بەلگىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، مەسىلەن مىكروبوبۇلغا مۇناسىۋەتلىك ئاقسىل تاۋ (MAPT; P = 3.52 × 10−8) ، نېرۋا ئاجىزلىقى (NEFL; P = 6.56 × 10−3) ، ئۆسۈشكە مۇناسىۋەتلىك ئاقسىل 43. . P = 3.43 × 10−4) ۋە VGF نېرۋا ئۆسۈش ئامىلى (VGF; P = 4.83 × 10−3) (4-6). قانداقلا بولمىسۇن ، بىز باشقا ئىنتايىن مۇھىم نىشانلارنىمۇ ئېنىقلىدۇق ، مەسىلەن GDP ئايرىلىشنى تىزگىنلىگۈچى 1 (GDI1; P = 1.54 × 10-10) ۋە SPARC غا مۇناسىۋەتلىك مودۇل كالتسىي باغلاش 1 (SMOC1; P = 6.93 × 10-9). گېن ئونتولوگىيەسى (GO) 225 ئاقسىلنى ئانالىز قىلىپ ، بەدەننىڭ سۇيۇقلۇق جەريانى بىلەن ستېروئىد مېتابولىزمى ، قاننىڭ قېتىشىشى ۋە ھورموننىڭ پائالىيىتى بىلەن قويۇق باغلىنىشنى ئاشكارىلىدى (1B رەسىم ۋە S2B جەدۋەل). بۇنىڭغا سېلىشتۇرغاندا ، 303 نىڭ كۆرۈنەرلىك يۇقىرى كۆتۈرۈلگەن ئاقسىل ھۈجەيرە قۇرۇلمىسى ۋە ئېنېرگىيە مېتابولىزمى بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك.
(A) يانار تاغ سىگىنالىدا T-test ئارقىلىق ئېرىشكەن -log10 ستاتىستىكىلىق P قىممىتى (y-axis) غا سېلىشتۇرغاندا ، log2 قاتلىنىش ئۆزگىرىشى (x ئوق) كۆرسىتىلدى ، بۇ كونترول (CT) بىلەن پەرقلىق ئىپادىنى بايقاشقا ئىشلىتىلىدۇ. CSF ئاقسىلىنىڭ AD ئەھۋاللىرى بارلىق ئاقسىللارنىڭ ئىچىدە. مىلادىيەدە كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىگەن ئاقسىل (P <0.05) كۆك رەڭدە ، كېسەللىك دەرىجىسى كۆرۈنەرلىك يۇقىرى بولغان ئاقسىل قىزىل رەڭدە كۆرسىتىلىدۇ. تاللانغان ئاقسىلغا بەلگە قويۇلغان. (B) ئاقسىلغا مۇناسىۋەتلىك ئەڭ ياخشى GO ئاتالغۇلىرى AD دا كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلەيدۇ (كۆك) ۋە كۆپىيىدۇ (قىزىل). بىئولوگىيىلىك جەريان ، مولېكۇلا فۇنكسىيەسى ۋە ھۈجەيرە زاپچاسلىرى ساھەسىدە ئەڭ يۇقىرى z- نومۇر بىلەن ئۈچ GO ئاتالغۇسىنى كۆرسىتىدۇ. (C) MS CSF ئەۋرىشكىسى (سولدا) ۋە ئۇنىڭ ELISA tau سەۋىيىسى (ئوڭدا) بىلەن MAPT دەرىجىسىنى ئۆلچەپ چىقتى. Pearson نىڭ مۇناسىۋەتلىك P قىممىتى بىلەن مۇناسىۋەتلىك كوئېففىتسېنتى كۆرسىتىلدى. بىر AD دېلوسىدا ELISA سانلىق مەلۇماتلىرى كەمچىل بولغانلىقتىن ، بۇ سانلىق مەلۇماتلار ئانالىز قىلىنغان 39 دېلونىڭ 38 ىنىڭ قىممىتىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. (D) نازارەت قىلىنغان گۇرۇپپا ئانالىزى (P <0.0001 ، Benjamini-Hochberg (BH) كونترولدىكى P <0.01) نى تەڭشىدى ، AD CSF سانلىق مەلۇماتلار توپلىمىدىكى ئەڭ كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرتىلگەن 65 خىل ئاقسىلنى ئىشلىتىپ ئەۋرىشكە بايقىدى. قېلىپلاشتۇرۇش ، نورماللاشتۇرۇش.
MAPT نىڭ ئاقسىل سەۋىيىسى مۇستەقىل ئۆلچەم قىلىنغان ELISA تاۋ سەۋىيىسى (r = 0.78 ، P = 7.8 × 10-9 ؛ 1C رەسىم) بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، بىزنىڭ MS ئۆلچەشنىڭ توغرىلىقىنى قوللايدۇ. ئامىلوئىد ئالدى ئاقسىل (APP) سەۋىيىسىدىكى تىرىپسىن ھەزىم قىلىنغاندىن كېيىن ، Aβ1-40 ۋە Aβ1-42 نىڭ C تېرمىنالىغا سىزىلغان ئىزفورما خاراكتېرلىك پېپتىدلار ئۈنۈملۈك ھالدا ئىئونلاشتۇرۇلمايدۇ (27 ، 28). شۇڭلاشقا ، بىز ئېنىقلىغان APP پېپتىدلىرىنىڭ ELISA Aβ1-42 سەۋىيىسى بىلەن مۇناسىۋىتى يوق. ھەر بىر ئەھۋالنىڭ پەرقلىق ئىپادىسىنى باھالاش ئۈچۈن ، بىز P <0.0001 [يالغان بايقاش نىسبىتى (FDR) تۈزىتىلگەن P <0.01] بىلەن پەرقلىق ئىپادىلەنگەن ئاقسىلنى ئىشلىتىپ ئەۋرىشكەلەرنى نازارەت قىلىدىغان گۇرۇپپا ئانالىزى قىلدۇق (S2A جەدۋەل). 1D رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، كونترول قىلىشقا ئوخشاش ئالاھىدىلىككە ئىگە بىر AD دېلوسىنى ھېسابقا ئالمىغاندا ، ئىنتايىن مۇھىم بولغان بۇ 65 خىل ئاقسىل كېسەللىك ئەھۋالىغا ئاساسەن ئەۋرىشكە توپلىيالايدۇ. بۇ 65 خىل ئاقسىلنىڭ 63 ى مىلادىيەدە كۆپەيگەن ، پەقەت ئىككىسى (CD74 ۋە ISLR) ئازايغان. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى ئانالىزلىرى مىلادىيەدە كېسەللىك بىئولوگىيىلىك ماركا رولىنى ئوينايدىغان يۈزلىگەن ئاقسىلنى ئېنىقلاپ چىقتى.
ئاندىن بىز AD مېڭە ئاقسىلىنى مۇستەقىل تور ئانالىزى قىلدۇق. بۇ بايقاشنىڭ چوڭ مېڭە توپى كونترول قىلىش (n = 10) ، يان تەرەپتىكى ئالدى مېڭە پوستلاق قەۋىتى (DLPFC) ، پاركىنسون كېسىلى (PD; n = 10) ، AD / PD (n = 10) ۋە AD (n = 10) كېسەللىكلىرىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. ) Sample. Emery Goizueta ADRC. بۇ 40 خىل ئەھۋالنىڭ نوپۇس ئەھۋالى ئىلگىرى بايان قىلىنغان (25) ۋە S1B جەدۋەلدە يىغىنچاقلاندى. بىز TMT-MS ئارقىلىق بۇ 40 چوڭ مېڭە توقۇلمىلىرى ۋە 27 خىل كۆپەيتىش گۇرۇپپىسىنى تەھلىل قىلدۇق. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ ئىككى چوڭ مېڭە سانلىق مەلۇمات توپلىمى 227،121 ئۆزگىچە پېپتىد ئىشلەپچىقارغان بولۇپ ، بۇلار 12 مىڭ 943 ئاقسىل (25) گە سىزىلغان. كېيىنكى تەكشۈرۈشلەرگە كەم دېگەندە% 50 دېلودا مىقدارلاشقان ئاشۇ ئاقسىللارلا كىرگۈزۈلگەن. ئەڭ ئاخىرقى بايقاش سانلىق مەلۇمات توپلىمىدا 8817 مىقداردىكى ئاقسىل بار. ياش ، جىنس ۋە ئۆلگەندىن كېيىنكى ئارىلىق (PMI) غا ئاساسەن ئاقسىلنىڭ مول بولۇش دەرىجىسىنى تەڭشەڭ. چېكىنىشتىن كېيىنكى سانلىق مەلۇماتلارنىڭ پەرقلىق ئىپادىلەش ئانالىزىدا كۆرسىتىلىشىچە ، ئىككى ياكى ئۇنىڭدىن ئارتۇق كېسەللىكلەر توپىدا> 2000 ئاقسىلنىڭ سەۋىيىسى كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرگەن. ئاندىن ، بىز ئوخشىمىغان ئىپادىلەنگەن ئاقسىلغا ئاساسەن نازارەت قىلىنغان گۇرۇپپا ئانالىزى ئېلىپ باردۇق ، AD / كونترول ۋە / ياكى AD / PD سېلىشتۇرۇشتا P <0.0001 (S2 ، A ۋە B رەسىملەر ، S2C جەدۋەل). يۇقىرى دەرىجىدە ئۆزگەرتىلگەن بۇ 165 خىل ئاقسىل كونترول قىلىش ۋە PD ئەۋرىشكىسىدىن AD پاتولوگىيەلىك كېسەللىكلەرنى ئېنىق تەسۋىرلەپ ، پۈتكۈل ئاقسىلدىكى AD تىپىدىكى كۈچلۈك ئۆزگىرىشلەرنى ئىسپاتلايدۇ.
ئاندىن بىز ئېغىرلىقتىكى گېن ئورتاق ئىپادىلەش تورى ئانالىزى (WGCNA) دەپ ئاتىلىدىغان ئالگورىزىمنى ئىشلىتىپ ، بايقالغان مېڭە ئاقسىلى ئۈستىدە تور ئانالىزى ئېلىپ باردۇق ، ئۇ ئوخشاش ئىپادىلەش ئەندىزىسىدىكى ئاقسىل مودۇلىغا ئورۇنلاشتۇرۇلغان سانلىق مەلۇماتلارنى تەشكىللەيدۇ (11-13). ئانالىزدا 44 مودۇل (M) ئورتاق ئىپادىلەنگەن ئاقسىل ئېنىقلاندى ، رەتلەنگەن ۋە ئەڭ چوڭ (M1 ، n = 1821 ئاقسىل) دىن ئەڭ كىچىكىگىچە (M44 ، n = 34 ئاقسىل) (2A رەسىم ۋە S2D جەدۋەل). يۇقىرىدا دەپ ئۆتكىنىمىزدەك (13) ھەر بىر مودۇلنىڭ ۋەكىللىك ئىپادىلەش ئارخىپى ياكى خاراكتېردىكى ئاقسىلنى ھېسابلاپ ، ئۇنى كېسەللىك ئەھۋالى ۋە AD كېسەللىكلىرى بىلەن باغلاڭ ، يەنى ئالزىمېر كېسەللىكى تىزىملاش ئورگىنى (CERAD) بىلەن براك نومۇرى (2B رەسىم). ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، 17 مودۇل AD نېرۋا كېسەللىكى (P <0.05) بىلەن كۆرۈنەرلىك مۇناسىۋەتلىك. بۇ كېسەللىككە مۇناسىۋەتلىك مودۇللارنىڭ كۆپىنچىسىدە ھۈجەيرە تىپىدىكى بەلگىلەرمۇ مول (2B رەسىم). يۇقىرىدا دېيىلگەندەك (13) ، ھۈجەيرە تىپىنىڭ موللىنىشى مودۇلنىڭ قاپلىنىشى ۋە ھۈجەيرە تىپىدىكى گېنلارنىڭ پايدىلىنىش تىزىملىكىنى تەھلىل قىلىش ئارقىلىق بەلگىلىنىدۇ. بۇ گېنلار يەككە چاشقان نېرۋا ھۈجەيرىسى ، بالىياتقۇ ئىچكى پەردىسى ۋە يىلىك ھۈجەيرىسىدە ئېلان قىلىنغان سانلىق مەلۇماتلاردىن كەلگەن. RNA تەرتىپى (RNA-seq) تەجرىبىسى (29).
(A) چوڭ مېڭە ئاقسىلىنىڭ WGCNA نى بايقاش. (B) Biweight midcorrelation (BiCor) مودۇللۇق ئىمزا ئاقسىلى (مودۇللۇق ئاقسىل ئىپادىسىنىڭ بىرىنچى ئاساسلىق تەركىبى) AD نېرۋا كېسەللىكلىرى ئالاھىدىلىكى (ئۈستى) ، CERAD (Aβ تاختىسى) ۋە Braak (tau tangles) نومۇرىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. مۇسبەت (قىزىل) ۋە مەنپىي (كۆك) باغلىنىشنىڭ كۈچلۈكلۈك دەرىجىسى ئىككى خىل رەڭلىك ئىسسىقلىق خەرىتىسى ئارقىلىق كۆرسىتىلىدۇ ، يۇلتۇزلار ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتنى كۆرسىتىدۇ (P <0.05). Hypergeometric Fisher نىڭ ئېنىق سىنىقى (FET) (ئاستى) ئارقىلىق ھەر بىر ئاقسىل مودۇلىنىڭ ھۈجەيرە تىپىدىكى باغلىنىشىنى باھالىڭ. قىزىل سايەنىڭ كۈچلۈكلۈكى ھۈجەيرە تىپىنىڭ بېيىش دەرىجىسىنى ، يۇلتۇز بەلگىسى ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتنى كۆرسىتىدۇ (P <0.05). BH ئۇسۇلىنى ئىشلىتىپ FET دىن ھاسىل قىلىنغان P قىممىتىنى توغرىلاڭ. (3) مودۇللۇق ئاقسىلنىڭ GO ئانالىزى. ئەڭ زىچ مۇناسىۋەتلىك بىئولوگىيىلىك جەريانلار ھەر بىر بۆلەك ياكى مۇناسىۋەتلىك مودۇل گۇرۇپپىسىدا كۆرسىتىلىدۇ. oligo, oligodendrocyte.
بىر يۈرۈش زىچ مۇناسىۋەتلىك بەش خىل ئاسترونوتىك ۋە مىكرو مول مول مودۇل (M30 ، M29 ، M18 ، M24 ۋە M5) AD نېرۋا كېسەللىكى بىلەن كۈچلۈك ئاكتىپ باغلىنىشنى كۆرسەتتى (2B رەسىم). ئونتولوگىيە ئانالىزى بۇ گىللىق مودۇللارنى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشى ، كۆپىيىشى ۋە ئىممۇنىتېت كۈچى بىلەن باغلايدۇ (2C رەسىم ۋە S2E جەدۋەل). M8 ۋە M22 دىن باشقا ئىككى خىل قوشۇمچە مودۇلمۇ كېسەللىكتە كۈچلۈك تەڭشەلدى. M8 تولغاققا ئوخشاش قوبۇللىغۇچى قوبۇل قىلىش يولى بىلەن ناھايىتى زىچ مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، تۇغما ئىممۇنىتېت ئىنكاسىدا ئاچقۇچلۇق رول ئوينايدۇ. شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، M22 تەرجىمىدىن كېيىنكى ئۆزگەرتىش بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك. M2 تەركىبىدە مول بولغان ئولىگودېندروتسىد بار بولۇپ ، AD كېسەللىكلىرى بىلەن كۈچلۈك ئاكتىپ باغلىنىشنى ۋە يادرونىڭ بىرىكتۈرۈلۈشى ۋە DNA نىڭ كۆپەيتىلىشى بىلەن ئونتولوگىيەلىك باغلىنىشنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، بۇ كېسەللىكلەرنىڭ ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشىنى كۈچەيتىدۇ. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ بايقاشلار بىز ئىلگىرى AD تور ئاقسىلىدا كۆرگەن گىللىق مودۇللارنىڭ ئېگىزلىكىنى قوللايدۇ (13 ، 17). نۆۋەتتە توردىكى نۇرغۇن AD غا مۇناسىۋەتلىك گىللىق مودۇللارنىڭ كونترول ۋە PD كېسەللىكلىرىنىڭ ئىپادىلەش سەۋىيىسىنىڭ تۆۋەنلىكىنى كۆرسىتىپ ، ئۇلارنىڭ كېسەللىك ئالاھىدىلىكى AD دا يۇقىرى كۆتۈرۈلگەنلىكىنى كۆرسىتىپ بەردى (S2C رەسىم).
تورىمىزدىكى ئاقسىلدىكى پەقەت تۆت مودۇل (M1, M3, M10 ۋە M32) AD پاتولوگىيىسى (P <0.05) بىلەن كۈچلۈك سەلبىي باغلىنىشلىق (2-رەسىم ، B ۋە C). M1 ۋە M3 ھەر ئىككىلىسىدە نېرۋا بەلگىسى مول. M1 ماس قەدەملىك سىگنال بىلەن ئىنتايىن مۇناسىۋەتلىك ، M3 بولسا خوندىرىئوسوملۇق ئىقتىدار بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك. M10 ۋە M32 ئۈچۈن ھۈجەيرە تىپىنىڭ بېيىغانلىقىغا ئائىت ھېچقانداق پاكىت يوق. M32 M3 بىلەن ھۈجەيرىلەرنىڭ مېتابولىزمى ئوتتۇرىسىدىكى باغلىنىشنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ ، M10 بولسا ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشى ۋە مىكرو قۇتۇب ئىقتىدارى بىلەن ئىنتايىن مۇناسىۋەتلىك. AD بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، تۆت مودۇلنىڭ ھەممىسى كونترول ۋە PD دا كۈچەيتىلىپ ، ئۇلارغا كېسەللىك خاراكتېرلىك AD ئۆزگىرىشلىرى بېرىدۇ (S2C رەسىم). ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ نەتىجىلەر بىز ئىلگىرى مىلادىيەدە كۆرگەن نېرۋا مول مودۇللارنىڭ ئازلاپ كېتىشىنى قوللايدۇ (13 ، 17). خۇلاسىلەپ ئېيتقاندا ، بىز بايقىغان مېڭە ئاقسىلىنىڭ تور ئانالىزى ئىلگىرىكى بايقاشلىرىمىزغا ماس كېلىدىغان AD مەخسۇس ئۆزگەرتىلگەن مودۇللارنى ئىشلەپچىقاردى.
AD دەسلەپكى ئالامەتسىز باسقۇچ (AsymAD) بىلەن خاراكتېرلىنىدۇ ، بۇ باسقۇچتا شەخسلەر كلىنىكىلىق بىلىش تۆۋەنلىمەي ئامىلوئىد يىغىلىشىنى كۆرسىتىدۇ (5 ، 31). بۇ ئالامەتسىز باسقۇچ بالدۇر بايقاش ۋە ئارىلىشىشنىڭ ھالقىلىق كۆزنىكىگە ۋەكىللىك قىلىدۇ. بىز ئىلگىرى مۇستەقىل سانلىق مەلۇماتلار توپلىمىدىكى AsymAD ۋە AD مېڭە تورى ئاقسىلىنىڭ كۈچلۈك مودۇللۇق قوغدىلىشىنى نامايان قىلدۇق (13 ، 17). بىز ھازىر بايقىغان مېڭە تورىنىڭ ئىلگىرىكى بايقاشلار بىلەن بىردەك بولۇشىغا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، بىز 27 DLPFC تەشكىلاتىدىن كۆپەيتىلگەن سانلىق مەلۇماتتا 44 مودۇلنىڭ ساقلىنىشىنى تەھلىل قىلدۇق. بۇ تەشكىلاتلار كونترول (n = 10) ، AsymAD (n = 8) ۋە AD (n = 9) ئەھۋاللىرىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. كونترول قىلىش ۋە AD ئەۋرىشكىسى بىزنىڭ بايقاش مېڭە توپىمىزنى ئانالىز قىلىشقا كىرگۈزۈلدى (جەدۋەل S1B) ، AsymAD ئەھۋاللىرى پەقەت كۆپەيتىش گۇرۇپپىسىدا ئۆزگىچە ئىدى. بۇ AsymAD دېلولىرى يەنە Emory Goizueta ADRC مېڭە بانكىسىدىن كەلگەن. گەرچە ئۆلگەندە بىلىش نورمال بولسىمۇ ، ئامىلوئىدنىڭ مىقدارى بىنورمال يۇقىرى (CERAD ، 2.8 ± 0.5) (S1B جەدۋەل).
TMT-MS بۇ 27 مېڭە توقۇلمىلىرىنى ئانالىز قىلىپ ، 11244 ئاقسىلنىڭ مىقدارىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى. بۇ ئاخىرقى سان پەقەت ئاز دېگەندە% 50 ئەۋرىشكە تەركىبىدىكى ئاقسىلنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. بۇ كۆپەيتىلگەن سانلىق مەلۇماتلار توپلىمى بىزنىڭ بايقاش مېڭە ئانالىزىمىزدا بايقالغان 8817 ئاقسىلنىڭ 8638 (% 98.0) نى ئۆز ئىچىگە ئالغان بولۇپ ، كونترول قىلىش بىلەن AD توپى ئارىسىدا 3000 غا يېقىن ئاقسىل كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرگەن (P <0.05 ، تۇكېينىڭ جۈپتى t سىنىقىدىن كېيىن). جەدۋەل S2F). ئوخشىمىغان ئىپادىلەنگەن ئاقسىللار ئىچىدە ، 910 يەنە AD بىلەن مېڭە ئاقسىلىنى كونترول قىلىش دېلولىرى ئارىسىدا كۆرۈنەرلىك دەرىجىدىكى ئۆزگىرىشلەرنى كۆرسەتتى (P <0.05 ، ANOVA Tukey جۈپ T سىناقتىن كېيىن). دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، بۇ 910 بەلگە ئاقسىل ئارىسىدىكى ئۆزگىرىش يۆنىلىشىدە بىردەك (r = 0.94 ، P <1.0 × 10-200) (S3A رەسىم). كۆپىيىۋاتقان ئاقسىللار ئىچىدە ، سانلىق مەلۇماتلار توپلىمىدىكى ئەڭ تۇراقلىق ئۆزگىرىش بولغان ئاقسىللار ئاساسلىقى يەر شارى مول M5 ۋە M18 مودۇللىرىنىڭ ئەزالىرى (MDK, COL25A1, MAPT, NTN1, SMOC1 ۋە GFAP). ئازايغان ئاقسىللار ئىچىدە ، ئەڭ تۇراقلىق ئۆزگىرىش بولغانلار ئاساسەن دېگۈدەك ماس قەدەملىك M1 مودۇلى (NPTX2, VGF ۋە RPH3A) نىڭ ئەزالىرى ئىدى. بىز ئوتتۇرا ھال (MDK) ، CD44 ، ئاجرىتىپ چىقىرىلغان توڭلىتىلغان ئاقسىل 1 (SFRP1) ۋە VGF نىڭ AD غا مۇناسىۋەتلىك ئۆزگىرىشىنى غەربنىڭ پارچىلىنىشى ئارقىلىق تېخىمۇ ئېنىقلىدۇق (S3B رەسىم). مودۇلنى قوغداش ئانالىزىدا كۆرسىتىلىشىچە ، چوڭ مېڭە ئاقسىلىدىكى% 80 ئاقسىل مودۇلى (34/44) كۆپەيتىش سانلىق مەلۇمات توپلىمىدا كۆرۈنەرلىك ساقلانغان (z- نومۇر> 1.96 ، FDR P <0.05 نى تۈزەتكەن) (S3C رەسىم). بۇ مودۇللارنىڭ 14 ى ئىككى ئاقسىل ئارىسىدا ئالاھىدە ساقلانغان (z- نومۇر> 10 ، FDR تۈزىتىلگەن P <1.0 × 10−23). ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، چوڭ مېڭە ئاقسىلى ئارىسىدىكى پەرقلىق ئىپادىلەش ۋە مودۇللۇق تەركىبتىكى يۇقىرى دەرىجىدىكى ئىزچىللىقنىڭ بايقىلىشى ۋە كۆپەيتىلىشى AD ئالدى مېڭە پوستلاق ئاقسىلىدىكى ئۆزگىرىشلەرنىڭ كۆپىيىشىنى گەۋدىلەندۈرىدۇ. ئۇنىڭدىن باشقا ، ئۇ يەنە AsymAD ۋە تېخىمۇ ئىلغار كېسەللىكلەرنىڭ چوڭ مېڭە تور قۇرۇلمىسىغا ئوخشايدىغانلىقىنى ئىسپاتلىدى.
چوڭ مېڭىنى كۆپەيتىش سانلىق مەلۇماتلىرى توپلىمىدىكى پەرقلىق ئىپادىنى تېخىمۇ تەپسىلىي تەھلىل قىلغاندا ، AsymAD ئاقسىلىنىڭ ئۆزگىرىشىنىڭ كۆرۈنەرلىك دەرىجىسىنى گەۋدىلەندۈردى ، بۇنىڭ ئىچىدە AsymAD بىلەن كونترول (P <0.05) ئارىسىدىكى جەمئىي 151 ئاقسىل كۆرۈنەرلىك ئۆزگەردى (S3D رەسىم). ئامىلوئىد يۈكىگە ماس ھالدا ، AsymAD ۋە AD نىڭ مېڭىسىدىكى APP كۆرۈنەرلىك ئاشتى. MAPT پەقەت AD دا كۆرۈنەرلىك ئۆزگىرىدۇ ، بۇ ساڭگىلمىلارنىڭ سەۋىيىسىنىڭ ئۆسۈشى ۋە بىلىشنىڭ تۆۋەنلىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك (5 ، 7). گىلال مول مودۇللار (M5 ۋە M18) ئاسىمدا ئاقسىلنىڭ كۆپىيىشىدە يۇقىرى ئەكس ئەتتۈرۈلگەن ، نېۋرونغا مۇناسىۋەتلىك M1 مودۇلى بولسا ئاسىمادتىكى ئاقسىلنىڭ ئەڭ تۆۋەن ۋەكىلى. بۇ AsymAD بەلگىسىنىڭ كۆپىنچىسى كېسەللىك ئالامەتلىرىدە تېخىمۇ چوڭ ئۆزگىرىشلەرنى كۆرسىتىدۇ. بۇ بەلگىلەر ئىچىدە SMOC1 بولۇپ ، M18 گە تەۋە بولغان ئاقسىل ئاقسىل بولۇپ ، مېڭە ئۆسمىسى ۋە كۆز ۋە پۇت-قوللارنىڭ يېتىلىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك (32). MDK بولسا ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشى ۋە ئانگېگېنېزېز (33) بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولغان گېپارىننى باغلايدىغان ئۆسۈش ئامىلى ، M18 نىڭ يەنە بىر ئەزاسى. كونترول گۇرۇپپىسىغا سېلىشتۇرغاندا ، AsymAD كۆرۈنەرلىك ئاشتى ، ئۇنىڭدىن كېيىن AD تېخىمۇ ئاشتى. بۇنىڭغا سېلىشتۇرغاندا ، ماس قەدەملىك ئاقسىل نېرۋا ئۆسمىسى 2 (NPTX2) AsymAD مېڭىسىدە كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىدى. NPTX2 ئىلگىرى نېرۋا ئاجىزلاش بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، ھاياجانلىنىشنىڭ ماس قەدەملىرىنى مۇرەسسە قىلىشتا تونۇلغان رولى بار (34). ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ نەتىجىلەر مىلادىيىدە كېسەللىكنىڭ ئېغىرلىقى بىلەن ئالغا ئىلگىرىلەۋاتقان ھەر خىل ئوخشىمىغان ئاقسىل ئۆزگىرىشلىرىنى ئاشكارىلايدۇ.
چوڭ مېڭە ئاقسىلىنى بايقاشتا كۆرۈنەرلىك دەرىجىدە ئاقسىل بىلەن قاپلىنىشنى قولغا كەلتۈرگەنلىكىمىزنى كۆزدە تۇتۇپ ، ئۇنىڭ تور دەرىجىلىك AD خاتىرىلەش خاتىرىسى بىلەن ئۇنىڭ بىر-بىرىگە باغلىنىشىنى تېخىمۇ تولۇق چۈشىنىشكە تىرىشىۋاتىمىز. شۇڭلاشقا ، بىز بايقىغان مېڭە ئاقسىلى بىلەن بىز ئىلگىرى AD (n = 308) ۋە كونترول (n = 157) DLPFC توقۇلمىلىرى (13) دىكى 18204 گېننىڭ مىكرو ئېلېمېنت ئۆلچەشتىن ھاسىل قىلغان مودۇلنى سېلىشتۇرۇپ كۆردۇق. قاپلاش. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بىز ئوخشىمىغان 20 خىل RNA مودۇلىنى ئېنىقلىدۇق ، ئۇلارنىڭ كۆپىنچىسى نېرۋا ھۈجەيرىسى ، ئولىگودېندروسسىت ، ئاسترونوتىك ۋە مىكروبلوگىيە قاتارلىق ئالاھىدە ھۈجەيرە تىپلىرىنىڭ بېيىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى (3A رەسىم). AD دىكى بۇ مودۇللارنىڭ كۆپ خىل ئۆزگىرىشى 3B رەسىمدە كۆرسىتىلدى. بىزنىڭ ئىلگىرىكى ئاقسىل- RNA ئۆز-ئارا ئانالىز قىلىشىمىزغا ماس ھالدا ، تېخىمۇ چوڭقۇر بەلگە قويۇلمىغان MS ئاقسىلى (تەخمىنەن 3000 ئاقسىل) (13) نى ئىشلىتىپ ، بىز بايقىغان چوڭ مېڭە ئاقسىل تورىدىكى 44 مودۇلنىڭ كۆپىنچىسى خاتىرىلەش تورىدا بار ، ھەتتا بۇنىڭ ئىچىدە كۆرۈنەرلىك ئۆز-ئارا باغلىنىش يوق. بىزنىڭ مېڭە ئاقسىلىدا يۇقىرى ساقلانغان 34 خىل ئاقسىل مودۇلىنى بايقىشىمىز ۋە كۆپەيتىشىمىز ، پەقەت 14 (~ 40%) فىشېرنىڭ ئېنىق سىنىقىدىن ئۆتتى (FET) خاتىرىلەش خاتىرىسى بىلەن ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتكە ئىگە ئىكەنلىكىنى ئىسپاتلىدى (3A رەسىم). DNA بۇزۇلۇشىنى ئەسلىگە كەلتۈرۈش (P-M25 ۋە P-M19) ، ئاقسىل تەرجىمىسى (P-M7 ۋە P-M20) ، RNA باغلاش / چاپلاش (P-M16 ۋە P-M21) ۋە ئاقسىلنى نىشانلاش (P-M13 ۋە P- M23) ترانسكرىپسىيەدىكى مودۇللار بىلەن قاپلانمايدۇ. شۇڭلاشقا ، نۆۋەتتىكى قاپلاش ئانالىزىدا (13) تېخىمۇ چوڭقۇر ئاقسىل سانلىق مەلۇماتلىرى ئىشلىتىلگەن بولسىمۇ ، AD تور ئاقسىلىنىڭ كۆپىنچىسى خاتىرىلەنگەن تورغا ماسلاشمىغان.
(A) Hypergeometric FET AD ترانسكرىپسىيەسىنىڭ (ئۈستى) نىڭ RNA مودۇلىدىكى ھۈجەيرە تىپىدىكى بەلگىلەرنىڭ بېيىغانلىقىنى ۋە AD مېڭىسىنىڭ RNA (x ئوق) بىلەن ئاقسىل (y ئوق) مودۇلى ئوتتۇرىسىدىكى ئۆز-ئارا باغلىنىش دەرىجىسىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. (ئاستى). قىزىل سايەنىڭ كۈچلۈكلۈكى ئۈستۈنكى تاختايدىكى ھۈجەيرە تىپلىرىنىڭ بېيىش دەرىجىسىنى ۋە ئاستى تاختايدىكى مودۇللارنىڭ ئۆز-ئارا ئۆرلەش دەرىجىسىنى كۆرسىتىدۇ. يۇلتۇزلار ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتنى كۆرسىتىدۇ (P <0.05). (2) ھەر بىر ترانسكرىپسىيەلىك مودۇلنىڭ خاس گېنى بىلەن AD ئورنى ئوتتۇرىسىدىكى باغلىنىش دەرىجىسى. سول تەرەپتىكى مودۇللار AD (كۆك) بىلەن ئەڭ سەلبىي باغلىنىشلىق ، ئوڭ تەرەپتىكىسى AD (قىزىل) بىلەن ئەڭ ئاكتىپ باغلىنىشلىق. خاتىرىگە ئۆزگەرتىلگەن BH تۈزىتىلگەن P قىممىتى ھەر بىر باغلىنىشنىڭ ستاتىستىكىلىق ئەھمىيىتىنى كۆرسىتىدۇ. (3) ئورتاق كاتەكچە تىپى مول بولغان مۇھىم قاپلاش مودۇلى. (4) قاپلانغان مودۇلدىكى ئاقسىل (x ئوق) ۋە RNA (y ئوق) نىڭ log2 ھەسسە ئۆزگىرىشىنى مۇناسىۋەتلىك تەھلىل. Pearson نىڭ مۇناسىۋەتلىك P قىممىتى بىلەن مۇناسىۋەتلىك كوئېففىتسېنتى كۆرسىتىلدى. Micro, microglia; ئاسمان جىسىملىرى ، ئاسترونومىيە. CT ، كونترول.
كۆپىنچە قاپلانغان ئاقسىل ۋە RNA مودۇلى ئوخشاش تۈردىكى ھۈجەيرە بېيىش ئارخىپى ۋە ئىزچىل AD ئۆزگىرىش يۆنىلىشىدىن ئورتاق بەھىرلىنىدۇ (3-رەسىم ، B ۋە C). باشقىچە قىلىپ ئېيتقاندا ، چوڭ مېڭە ئاقسىلىنىڭ ماس قەدەملىك M1 مودۇلى (PM 1) ئۈچ خىل نېرۋا مول بولغان گومولوگىيىلىك RNA مودۇلى (R-M1, R-M9 ۋە R-M16) غا ماسلاشتۇرۇلغان بولۇپ ، بۇلار AD ھەر ئىككىسىدە كۆرسىتىلگەن. تۆۋەنلىتىلگەن سەۋىيە. ئوخشاشلا ، گىلاس مول بولغان M5 ۋە M18 ئاقسىل مودۇللىرى RNA مودۇلى بىلەن ئاسترونومىيە ۋە مىكرو بەلگە (R-M3, R-M7 ۋە R-M10) مول بولۇپ ، كېسەللىكلەرنىڭ كۆپىيىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك. بۇ ئىككى سانلىق مەلۇمات توپلىمىدىكى ئورتاق بەھرىلىنىدىغان مودۇللۇق ئىقتىدارلار بىز چوڭ مېڭە ئاقسىلىدا كۆرگەن ھۈجەيرە تىپىنى بېيىتىش ۋە كېسەللىككە مۇناسىۋەتلىك ئۆزگىرىشلەرنى تېخىمۇ قوللايدۇ. قانداقلا بولمىسۇن ، بىز بۇ ئورتاق بۆلەكلەردە RNA بىلەن يەككە بەلگىلەرنىڭ ئاقسىل سەۋىيىسى ئوتتۇرىسىدا نۇرغۇن كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى بايقىدۇق. بۇ قاپلانغان مودۇل ئىچىدىكى مولېكۇلانىڭ ئاقسىل ۋە ترانسكرىپومىكىنىڭ پەرقلىق ئىپادىلىنىشىنىڭ باغلىنىشلىق ئانالىزى (3D رەسىم) بۇ ماسلاشماسلىقنى گەۋدىلەندۈردى. مەسىلەن ، APP ۋە باشقا بىر قانچە گىللىق مودۇل ئاقسىلى (NTN1, MDK, COL25A1, ICAM1 ۋە SFRP1) AD ئاقسىلىدا كۆرۈنەرلىك ئېشىش كۆرۈلگەن ، ئەمما AD خاتىرىسىدە ھېچقانداق ئۆزگىرىش بولمىغان. بۇ خىل ئاقسىلغا مۇناسىۋەتلىك ئۆزگىرىشلەر ئامىلوئىد تاختىلىرى بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك بولۇشى مۇمكىن (23 ، 35) ، ئاقسىلنى كېسەللىك ئۆزگىرىشىنىڭ مەنبەسى سۈپىتىدە گەۋدىلەندۈرۈپ بېرىدۇ ، بۇ ئۆزگىرىشلەر خاتىرىدە ئەكس ئەتتۈرۈلمەسلىكى مۇمكىن.
بىز بايقىغان چوڭ مېڭە ۋە CSF ئاقسىلىنى مۇستەقىل تەھلىل قىلغاندىن كېيىن ، بىز ئىككى سانلىق مەلۇمات توپلىمىنى ئەتراپلىق تەھلىل قىلىپ ، چوڭ مېڭە تورىنىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسىغا مۇناسىۋەتلىك AD CSF بىئولوگىيىلىك بەلگىسىنى ئېنىقلىدۇق. بىز ئالدى بىلەن ئىككى ئاقسىلنىڭ قاپلىنىشىنى ئېنىقلىشىمىز كېرەك. گەرچە CSF نىڭ AD مېڭىسىدىكى نېرۋا خىمىيىلىك ئۆزگىرىشىنى ئەكىس ئەتتۈرىدىغانلىقى كەڭ ئېتىراپ قىلىنغان بولسىمۇ ، ئەمما AD مېڭىسى بىلەن CSF ئاقسىلى ئوتتۇرىسىدىكى ئۆز-ئارا باغلىنىشنىڭ ئېنىق دەرىجىسى ئېنىق ئەمەس. ئىككى ئاقسىلدا بايقالغان ئورتاق گېن مەھسۇلاتلىرىنىڭ سانىنى سېلىشتۇرۇش ئارقىلىق ، چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىدا بايقالغان ئاقسىلنىڭ% 70 كە يېقىن (n = 1936) چوڭ مېڭىدە مىقدارلاشقانلىقىنى بايقىدۇق (4A رەسىم). بۇ خىل قاپلانغان ئاقسىللارنىڭ كۆپىنچىسى (n = 1721) بايقاش مېڭە سانلىق مەلۇماتلىرى توپلىمىدىكى 44 ئورتاق ئىپادىلەش مودۇلىنىڭ بىرىگە سىزىلغان (4B رەسىم). ئويلىغىنىدەك ، ئالتە چوڭ مېڭە مودۇلى (M1 دىن M6) ئەڭ كۆپ مىقداردىكى CSF قاپلاشنى نامايان قىلدى. قانداقلا بولمىسۇن ، چوڭ مېڭە مودۇلى بار (مەسىلەن ، M15 ۋە M29) ئويلىمىغان يەردىن يۇقىرى دەرىجىدىكى قاپلاشنى ئەمەلگە ئاشۇرىدۇ ، چوڭ مېڭىنىڭ مودۇلىدىن ئىككى ھەسسە چوڭ. بۇ بىزنىڭ تېخىمۇ چوڭ ، ستاتىستىكىلىق قوزغىتىش ئۇسۇلىنى قوللىنىشىمىزغا ئىلھام بېرىپ ، چوڭ مېڭە بىلەن چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى ئوتتۇرىسىدىكى قاپلىنىشنى ھېسابلايدۇ.
(A ۋە B) بايقاش مېڭىسىدە بايقالغان ئاقسىللار ۋە CSF سانلىق مەلۇماتلىرى بىر-بىرىگە باغلانغان. بۇ خىل قاپلانغان ئاقسىللارنىڭ كۆپىنچىسى چوڭ مېڭە ئورتاق ئىپادىلەش تورىنىڭ 44 ئورتاق ئىپادىلەش مودۇلىنىڭ بىرى بىلەن مۇناسىۋەتلىك. (3) چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى ئاقسىلى بىلەن چوڭ مېڭە ئاقسىلى ئوتتۇرىسىدىكى قاپلىنىشنى بايقايسىز. ئىسسىقلىق خەرىتىسىنىڭ ھەر بىر قۇرلىرى يۇقىرى قان بېسىمى FET نىڭ ئايرىم-ئايرىم تەكرارلانغان ئانالىزىغا ۋەكىللىك قىلىدۇ. ئۈستۈنكى قۇردا چوڭ مېڭە مودۇلى بىلەن پۈتكۈل CSF ئاقسىلى ئوتتۇرىسىدىكى قاپلاش (كۈلرەڭ / قارا سايە) تەسۋىرلەنگەن. ئىككىنچى قۇردا چوڭ مېڭە مودۇلى بىلەن CSF ئاقسىلى (قىزىل رەڭدە سايە) ئوتتۇرىسىدىكى ئۆز-ئارا باغلىنىشنىڭ AD (P <0.05) دە كۆرۈنەرلىك تەڭشەلگەنلىكى تەسۋىرلەنگەن. ئۈچىنچى قاتاردا كۆرسىتىلىشىچە ، چوڭ مېڭە مودۇلى بىلەن CSF ئاقسىلى (كۆك سايە) ئوتتۇرىسىدىكى ئۆز-ئارا باغلىنىش AD (P <0.05) دا كۆرۈنەرلىك تەڭشەلگەن. BH ئۇسۇلىنى ئىشلىتىپ FET دىن ھاسىل قىلىنغان P قىممىتىنى توغرىلاڭ. (4) كاتەكچە تىپى ۋە مۇناسىۋەتلىك GO ئاتالغۇلىرىغا ئاساسەن قاتلىنىدىغان مودۇل تاختىسى. بۇ تاختايلاردا جەمئىي 271 چوڭ مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك ئاقسىل بار بولۇپ ، CSF ئاقسىلىدا ئەھمىيەتلىك پەرقلەندۈرۈش ئىپادىسى بار.
تاق قۇيرۇقلۇق FET نى ئىشلىتىپ ، CSF ئاقسىلى بىلەن يەككە مېڭە مودۇلى ئارىسىدىكى ئاقسىلنىڭ ئۆزئارا باغلىنىشىنىڭ مۇھىملىقىنى باھالىدۇق. ئانالىزدىن ئايان بولۇشىچە ، CSF سانلىق مەلۇماتلار توپلىمىدىكى جەمئىي 14 چوڭ مېڭە مودۇلى ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتكە ئىگە (FDR تەڭشەلگەن P <0.05) ، ۋە قوشۇمچە مودۇل (M18) بولۇپ ، بىر-بىرىگە باغلىنىشچانلىقى مۇھىم (FDR تەڭشەلگەن P = 0.06) (4C رەسىم) , top row). بىز يەنە ئوخشىمىغان ئىپادىلەنگەن CSF ئاقسىلى بىلەن كۈچلۈك ئۆز-ئارا ماسلاشقان مودۇللارغا قىزىقىمىز. شۇڭلاشقا ، بىز ئىككى قوشۇمچە FET ئانالىزى ئىشلىتىپ ، قايسىسىنىڭ (i) CSF ئاقسىلىنىڭ قايسىسىنىڭ AD دا كۆرۈنەرلىك يۇقىرى كۆتۈرۈلگەنلىكىنى ۋە (ii) CSF ئاقسىلىنىڭ AD دا كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىگەنلىكىنى ئېنىقلىدۇق (P <0.05 ، جۈپ سىناق AD / كونترول) چوڭ مېڭە مودۇللىرى ئەھمىيەتلىك بىر-بىرىگە باغلانغان. ئۇلارنىڭ ئارىسىدا. 4C رەسىمنىڭ ئوتتۇرا ۋە ئاستى قۇرلىرىدا كۆرسىتىلگەندەك ، بۇ قوشۇمچە ئانالىزلاردا كۆرسىتىلىشىچە ، 44 چوڭ مېڭە مودۇلىنىڭ 8 ى AD CSF (M12, M1, M2, M18, M5, M44, M33 ۋە M38) غا قوشۇلغان ئاقسىل بىلەن كۆرۈنەرلىك بىر-بىرىگە باغلانغان. . ) ، پەقەت ئىككى مودۇل (M6 ۋە M15) AD CSF دىكى ئاقسىلنىڭ تۆۋەنلىشى بىلەن ئەھمىيەتلىك بىر-بىرىنى قاپلىغانلىقىنى كۆرسەتتى. ئويلىغىنىدەك ، 10 مودۇلنىڭ ھەممىسى 15 مودۇلدا بولۇپ ، ئەڭ يۇقىرى بولغاندا CSF ئاقسىلى بار. شۇڭلاشقا ، بىز بۇ 15 مودۇلنى AD مېڭىسىدىن ھاسىل بولغان CSF بىئولوگىيىلىك ماركىنىڭ يۇقىرى مەھسۇلاتلىق مەنبەسى دەپ پەرەز قىلىمىز.
بىز بۇ 15 قاپلانغان مودۇلنى ئۇلارنىڭ WGCNA دەرەخ دىئاگراممىسىدىكى يېقىنلىقى ۋە ئۇلارنىڭ ھۈجەيرە تىپى ۋە گېن ئونتولوگىيەسى بىلەن باغلىنىشىغا ئاساسەن بەش چوڭ ئاقسىل تاختىسىغا قاتلىدۇق (4D رەسىم). بىرىنچى گۇرۇپپىدا نېرۋا بەلگىسى ۋە ماس قەدەملىك ئاقسىل (M1 ۋە M12) مول بولغان مودۇل بار. ماس قەدەملىك تاختايدا جەمئىي 94 خىل ئاقسىل بار ، CSF ئاقسىلىدىكى سەۋىيىدە كۆرۈنەرلىك ئۆزگىرىش بولۇپ ، بەش تاختا ئىچىدىكى چوڭ مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك CSF بەلگىسىنىڭ ئەڭ چوڭ مەنبەسى بولۇپ قالدى. ئىككىنچى گۇرۇپپا (M6 ۋە M15) بالىياتقۇ ئىچكى ھۈجەيرە بەلگىسى ۋە قان تومۇر بىلەن قويۇق باغلىنىشنى كۆرسەتتى ، مەسىلەن «جاراھەتنى ئەسلىگە كەلتۈرۈش» (M6) ۋە «يۇمۇرلۇق ئىممۇنىتېت ئىنكاسىنى تەڭشەش» (M15). M15 يەنە ئاقسىل ئاقسىلى مېتابولىزمى بىلەنمۇ مۇناسىۋەتلىك ، بۇ بالىياتقۇ ئىچكى پەردىسى بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك (36). قان تومۇر تاختىسىدا مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك 34 CSF بەلگىسى بار. ئۈچىنچى گۇرۇپپا مودۇل (M2 ۋە M4) نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، بۇلار oligodendrocyte بەلگىسى ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشى بىلەن كۆرۈنەرلىك مۇناسىۋەتلىك. مەسىلەن ، M2 نىڭ يۇقىرى دەرىجىلىك ئونتولوگىيە ئاتالغۇلىرى «DNA كۆپەيتىشنى ئاكتىپ تەڭشەش» ۋە «پۇرىن بىئوسىنتېز جەريانى» نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، M4 نىڭ «گىل ھۈجەيرىسىنى پەرقلەندۈرۈش» ۋە «خروموسومنى ئايرىش» قاتارلىقلار بار. مېڭە تاختىسىدا مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك 49 CSF بەلگىسى بار.
تۆتىنچى گۇرۇپپىدا ئەڭ كۆپ مودۇل بار (M30 ، M29 ، M18 ، M24 ۋە M5) ، بارلىق مودۇللارنىڭ ھەممىسىدە مىكروب ۋە ئاسترونومىيە بەلگىسى كۆرۈنەرلىك مول. مىئېل تاختىسىغا ئوخشاش ، تۆتىنچى گۇرۇپپىدا يەنە ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشى بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك مودۇللار (M30 ، M29 ۋە M18) بار. بۇ گۇرۇپپىدىكى باشقا مودۇللار ئىممۇنىتېت ئاتالغۇلىرى بىلەن ئىنتايىن مۇناسىۋەتلىك ، مەسىلەن «ئىممۇنىتېت ئۈنۈمى جەريانى» (M5) ۋە «ئىممۇنىتېت ئىنكاسىنى تەڭشەش» (M24). يەر شارى ئىممۇنىتېت گۇرۇپپىسىدا مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك 42 CSF بەلگىسى بار. ئاخىرىدا ، ئەڭ ئاخىرقى گۇرۇپپىدا تۆت مودۇل (M44 ، M3 ، M33 ۋە M38) دىكى مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك 52 بەلگە بار ، بۇلارنىڭ ھەممىسى بەدەندە ئېنېرگىيە ساقلاش ۋە مېتابولىزم بىلەن مۇناسىۋەتلىك. بۇ مودۇللارنىڭ ئەڭ چوڭى (M3) خوندىرىئوسوم بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، مول نېرۋا خاراكتېرلىك بەلگە بار. M38 بۇ مېتابولىزمدىكى كىچىكرەك مودۇل ئەزالىرىنىڭ بىرى ، شۇنداقلا ئوتتۇراھال نېرۋا ئالاھىدىلىكىنى نامايان قىلىدۇ.
ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ بەش گۇرۇپپا AD پوستلاق قەۋىتىدىكى كەڭ ھۈجەيرە تىپى ۋە ئىقتىدارلىرىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ ، ھەمدە 271 چوڭ مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك CSF بەلگىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ (S2G جەدۋەل). بۇ MS نەتىجىلىرىنىڭ توغرىلىقىغا باھا بېرىش ئۈچۈن ، بىز يېقىنلىشىش كېڭەيتىش ئەسۋابى (PEA) نى ئىشلىتىپ ، كۆپ مەنبەلىك ئىقتىدار ، سەزگۈرلۈك ۋە ئېنىقلىق دەرىجىسى يۇقىرى بولغان ئورگانىك ئانتىتېلانى ئاساس قىلغان تېخنىكا ئارقىلىق ، چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى ئەۋرىشكىسىنى قايتا ئانالىز قىلىپ ، بۇ 271 بىئولوگىيىلىك ماركىنىڭ بىر قىسمىنى بايقىدۇق. (n = 36). بۇ 36 نىشان بىزنىڭ MS ئاساسىدىكى تەتقىقاتىمىز (r = 0.87 ، P = 5.6 × 10-12) بىلەن زىچ مۇناسىۋەتلىك بولغان PEA نىڭ AD كۆپ خىل ئۆزگىرىشىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، بۇ بىزنىڭ ئۇنىۋېرسال MS ئانالىز نەتىجىمىزنى كۈچلۈك دەلىللىدى (S4 رەسىم) ).
ماس قەدەملىك سىگنالدىن تارتىپ ئېنېرگىيەنىڭ مېتابولىزمىغىچە بولغان بەش گۇرۇپپىمىز تەكىتلىگەن بىئولوگىيىلىك تېمىلارنىڭ ھەممىسى مىلادىيە (1-3) نىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك. شۇڭلاشقا ، بۇ تاختىلارنى ئۆز ئىچىگە ئالغان 15 مودۇلنىڭ ھەممىسى بىز بايقىغان چوڭ مېڭە ئاقسىلىدىكى AD كېسەللىكلىرى بىلەن مۇناسىۋەتلىك (2B رەسىم). ئەڭ دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، بىزنىڭ يەر شارى مودۇلىمىز ئوتتۇرىسىدىكى ئەڭ چوڭ ئاكتىپ پاتولوگىيەلىك باغلىنىش ۋە بىزنىڭ ئەڭ چوڭ نېرۋا مودۇلىمىز (M1 ۋە M3) ئوتتۇرىسىدىكى كۈچلۈك پاسسىپ باغلىنىش. كۆپەيتىلگەن مېڭە ئاقسىلىمىزنىڭ پەرقلىق ئىپادىلەش ئانالىزى (S3D رەسىم) يەنە M5 ۋە M18 دىن ھاسىل بولغان گىللىق ئاقسىلنى گەۋدىلەندۈردى. AsymAD ۋە كېسەللىك ئالامىتى AD دە ، كۆپىيىۋاتقان گىللىق ئاقسىل ۋە M1 بىلەن مۇناسىۋەتلىك سىناپس ئاقسىل ئەڭ تۆۋەنلەيدۇ. بۇ كۆزىتىشلەر شۇنى كۆرسىتىپ بېرىدۇكى ، بىز بەش گۇرۇپپىدا بايقىغان 271 چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى بەلگىسى AD پوستلاق قەۋىتىدىكى كېسەللىك جەريانى بىلەن مۇناسىۋەتلىك ، بۇلار دەسلەپكى ئالامەتسىزلىنىش باسقۇچىدا كۆرۈلىدۇ.
چوڭ مېڭە ۋە ئومۇرتقا سۇيۇقلۇقىدىكى ئاقسىلنىڭ ئۆزگىرىش يۆنىلىشىنى تېخىمۇ ياخشى تەھلىل قىلىش ئۈچۈن ، بىز 15 قاپلانغان مودۇلنىڭ ھەر بىرىگە تۆۋەندىكىلەرنى سىزىپ چىقتۇق: ئاقسىل پەرقى چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىدا ئىپادىلىنىدۇ (S5 رەسىم). يۇقىرىدا دەپ ئۆتكىنىمىزدەك ، WGCNA چوڭ مېڭىدىكى مودۇلنىڭ موللىقى ياكى ئاقسىلنىڭ قىممىتىنى ئېنىقلاشقا ئىشلىتىلىدۇ (13). يانار تاغ خەرىتىسى چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى (AD / كونترول) دىكى مودۇللۇق ئاقسىلنىڭ پەرقلىق ئىپادىسىنى تەسۋىرلەشكە ئىشلىتىلىدۇ. بۇ سانلىق مەلۇماتلار بەش تاختىنىڭ ئۈچىنىڭ چوڭ مېڭە ۋە ئومۇرتقا سۇيۇقلۇقىنىڭ ئوخشىمىغان ئىپادىلىنىش يۈزلىنىشىنى كۆرسىتىپ بېرىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. ماس قەدەملىك تاختىنىڭ ئىككى مودۇلى (M1 ۋە M12) AD مېڭىسىدىكى موللىق دەرىجىسىنىڭ تۆۋەنلىگەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، ئەمما AD CSF دىكى ئاقسىلنىڭ كۆپىيىشى بىلەن كۆرۈنەرلىك ئۆز-ئارا مۇناسىۋەتلىك (S5A رەسىم). مېتابولىزم (M3 ۋە M38) نى ئۆز ئىچىگە ئالغان نېرۋا بىلەن مۇناسىۋەتلىك مودۇللار چوڭ مېڭە ۋە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىنىڭ ئىپادىلىنىش ئەندىزىسىنىڭ بىردەك ئەمەسلىكىنى كۆرسىتىپ بەردى (S5E رەسىم). قان تومۇر تاختىسى يەنە ئوخشىمىغان ئىپادىلەش يۈزلىنىشىنى كۆرسىتىپ بەردى ، گەرچە ئۇنىڭ مودۇلى (M6 ۋە M15) AD مېڭىسىدە ئوتتۇراھال يۇقىرى كۆتۈرۈلۈپ ، كېسەل بولغان CSF دا تۆۋەنلىگەن (S5B رەسىم). قالغان ئىككى تاختىدا چوڭ گىلەم تورى بار بولۇپ ، ئۇلارنىڭ ئاقسىللىرى ھەر ئىككى بۆلۈمدە ئۈزلۈكسىز تەڭشىلىدۇ (S5 ، C ۋە D).
شۇنىڭغا دىققەت قىلىڭكى ، بۇ يۈزلىنىشلەر بۇ تاختىدىكى بارلىق بەلگىلەرگە ئورتاق ئەمەس. مەسىلەن ، ماس قەدەملىك گۇرۇپپا AD مېڭىسى ۋە CSF دا كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىگەن بىر قانچە ئاقسىلنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ (S5A رەسىم). تۆۋەندە تەڭشەلگەن چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى بەلگىسى ئىچىدە M1 نىڭ NPTX2 ۋە VGF ، M12 نىڭ خروموگرانىن B. قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ خىل ئەھۋاللار بولسىمۇ ، بىزنىڭ ماس قەدەملىك بەلگىلەرنىڭ كۆپىنچىسى AD ئومۇرتقا سۇيۇقلۇقىدا يۇقىرى كۆتۈرۈلگەن. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ ئانالىزلار بەش گۇرۇپپىمىزنىڭ ھەر بىرىدە مېڭە ۋە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىنىڭ ستاتىستىكىلىق مۇھىم يۈزلىنىشىنى پەرقلەندۈرەلەيدىغان بولدى. بۇ يۈزلىنىشلەر AD بىلەن مېڭە ۋە CSF ئاقسىلنىڭ ئىپادىلىنىشى ئوتتۇرىسىدىكى مۇرەككەپ ۋە دائىم ئوخشىمايدىغان مۇناسىۋەتنى گەۋدىلەندۈرىدۇ.
ئاندىن ، بىز يۇقىرى ئۈنۈملۈك MS كۆپەيتىش ئانالىزى (CSF كۆپەيتىش 1) ئارقىلىق 271 يۈرۈش بىئولوگىيىلىك ماركامىزنى ئەڭ ئۈمىدۋار ۋە كۆپىيىشكە بولىدىغان نىشانغا تارايتتۇق (5A رەسىم). CSF كۆپەيتىلگەن نۇسخىسى Emory Goizueta ADRC دىن جەمئىي 96 ئەۋرىشكەنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، بۇلار كونترول ، AsymAD ۋە AD گۇرۇپپىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ (جەدۋەل S1A). بۇ AD كېسەللىكلىرى يېنىك دەرىجىدىكى بىلىشنىڭ تۆۋەنلىشى (MoCA ، 20.0 ± 3.8 دېگەن مەنىدە) ، چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىدا جەزملەشتۈرۈلگەن AD بىئولوگىيىلىك ماركا ئۆزگىرىشى بىلەن ئىپادىلىنىدۇ (S1A جەدۋەل). بىز بايقىغان CSF تەھلىلىنىڭ ئەكسىچە ، بۇ كۆپەيتىش تېخىمۇ ئۈنۈملۈك ۋە يۇقىرى ئۈنۈملۈك «يەككە ئوق» MS ئۇسۇلى ئارقىلىق (سىزىقسىز بۆلۈنمەي) ئېلىپ بېرىلىدۇ ، بۇنىڭ ئىچىدە ئاددىي ئەۋرىشكە تەييارلاش كېلىشىمنامىسى بار بولۇپ ، يەككە ئەۋرىشكەلەرنىڭ ئىممۇنىتېت يوقىتىش ئېھتىياجىنى يوقىتىدۇ. . ئەكسىچە ، ئىممۇنىتېت كۈچى ئاجىز بولغان «كۈچەيتىش قانىلى» ئاز ئاقسىلنىڭ سىگنالىنى كۈچەيتىش ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ (37). گەرچە ئۇ ئومۇمىي ئاقسىلنىڭ قاپلىنىش نىسبىتىنى تۆۋەنلىتىۋەتكەن بولسىمۇ ، ئەمما بۇ يەككە ئوق چىقىرىش ئۇسۇلى ماشىنىنىڭ ۋاقتىنى كۆرۈنەرلىك قىسقارتىدۇ ۋە ھاياتىي كۈچكە ئىگە ئانالىز قىلغىلى بولىدىغان TMT ماركىلىق ئەۋرىشكە سانىنى كۆپەيتىدۇ (17 ، 38). ئومۇمىي جەھەتتىن ئېلىپ ئېيتقاندا ، ئانالىزدا 647 پېپتىد بايقالغان بولۇپ ، 96 خىل كېسەلنىڭ 1183 ئاقسىلغا ماسلاشتۇرۇلغان. بىز بايقىغان CSF ئانالىزىغا ئوخشاش ، ئەۋرىشكىلەرنىڭ كەم دېگەندە% 50 ىدە مىقدارلاشقان ئاشۇ ئاقسىللار كېيىنكى ھېسابلاشقا كىرگۈزۈلۈپ ، سانلىق مەلۇمات ياش ۋە جىنسنىڭ تەسىرىگە ئۇچرىغان. بۇ 792 ئاقسىلنىڭ ئاخىرقى مىقدارلاشتۇرۇلۇشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى ، بۇنىڭ 95% ى بايقالغان CSF سانلىق مەلۇمات توپلىمىدىمۇ ئېنىقلاندى.
(A) مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك CSF ئاقسىل نىشانى تۇنجى كۆپەيتىلگەن CSF گۇرۇپپىسىدا دەلىللەنگەن ۋە ئاخىرقى گۇرۇپپىغا كىرگۈزۈلگەن (n = 60). (B دىن E) تۆت CSF كۆپەيتىش گۇرۇپپىسىدا ئۆلچەنگەن تاختا بىئولوگىيىلىك ماركا دەرىجىسى (بىرىكمە z نومۇرى). تۇكېينىڭ تۈزىتىشتىن كېيىنكى جۈپلەشتۈرۈلگەن T سىناقلىرى ياكى ANOVA ھەر بىر كۆپەيتىلگەن ئانالىزدا مول ئۆزگىرىشلەرنىڭ ستاتىستىكىلىق ئەھمىيىتىنى باھالاشقا ئىشلىتىلگەن. CT ، كونترول.
بىز ئەتراپلىق تەھلىل قىلىش ئارقىلىق 271 مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك CSF نىشانىمىزنى دەلىللەشكە قىزىقىدىغان بولغاچقا ، بۇ كۆپەيتىلگەن ئاقسىلنى يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەكشۈرۈشنى بۇ بەلگىلەر بىلەن چەكلەيمىز. بۇ 271 خىل ئاقسىل ئىچىدە ، CSF كۆپەيتىش 1 دە 100 بايقالغان. S6A رەسىمدە بۇ 100 قاپلاش بەلگىسىنىڭ كونترول بىلەن AD كۆپەيتىش ئەۋرىشكىسى ئوتتۇرىسىدىكى پەرقلىق ئىپادىلىنىشى كۆرسىتىلدى. ماس قەدەملىك ۋە مېتابولىت گىستونلىرى مىلادىيىدە ئەڭ كۆپ كۆپىيىدۇ ، قان تومۇر ئاقسىلى كېسەللىكلەردە ئەڭ تۆۋەنلەيدۇ. 100 قاپلانغان بەلگە (n = 70) نىڭ كۆپىنچىسى ئىككى سانلىق مەلۇمات توپلىمىدا ئوخشاش ئۆزگىرىش يۆنىلىشىنى ساقلىدى (S6B رەسىم). بۇ 70 دەلىللەنگەن چوڭ مېڭىگە مۇناسىۋەتلىك CSF بەلگىسى (S2H جەدۋەل) ئىلگىرى كۆزىتىلگەن تاختاينىڭ ئىپادىلىنىش يۈزلىنىشىنى ، يەنى قان تومۇر ئاقسىلىنىڭ تۆۋەن تەڭشىلىشى ۋە باشقا بارلىق تاختىلارنىڭ تەڭشىلىشىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ. دەلىللەنگەن بۇ 70 خىل ئاقسىلنىڭ پەقەت 10 سىلا AD تاختىسىنىڭ ئۆزگىرىشىنى كۆرسىتىپ بەردى. چوڭ مېڭە ۋە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىنىڭ ئومۇمىي يۈزلىنىشىنى ئەڭ ياخشى ئەكىس ئەتتۈرىدىغان گۇرۇپپا ھاسىل قىلىش ئۈچۈن ، بىز ئاخىرى تەكشۈرۈپ دەلىللىگەن قىزىقىش گۇرۇپپىسىدىن بۇ 10 خىل ئاقسىلنى چىقىرىۋەتتۇق (5A رەسىم). شۇڭلاشقا ، گۇرۇپپىمىز ئاخىرىدا ئوخشىمىغان ئەۋرىشكە تەييارلاش ۋە MS سۇپا ئانالىزىدىن پايدىلىنىپ ئىككى مۇستەقىل CSF AD گۇرۇپپىسىدا دەلىللەنگەن جەمئىي 60 ئاقسىلنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. CSF كۆپەيتىلگەن 1 كونترول ۋە AD ئەھۋاللىرىدىكى بۇ ئاخىرقى تاختىلارنىڭ z نومۇر ئىپادىلەش پىلانى بىز بايقىغان CSF گۇرۇپپىسىدا كۆرۈلگەن گۇرۇپپا يۈزلىنىشىنى ئىسپاتلىدى (5B رەسىم).
بۇ 60 خىل ئاقسىلنىڭ ئىچىدە AD بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئىكەنلىكى بىلىنگەن مولېكۇلا بار ، مەسىلەن سۆڭەك شالاڭلىشىش (SPP1) ، ئۇ نۇرغۇن تەتقىقاتلاردا (39-41) AD بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولغان ياللۇغ قايتۇرۇش سىتوكىن ۋە GAP43 ، ماس قەدەملىك ئاقسىل. بۇ نېرۋا ئاجىزلىقى بىلەن ئېنىق باغلانغان (42). ئەڭ تولۇق تەكشۈرۈلگەن ئاقسىل باشقا نېرۋا ئاجىزلاش كېسەللىكلىرى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بەلگە ، مەسىلەن ئامىيوفروفىك يان تەرەپتىكى قېتىشىش (ALS) مۇناسىۋەتلىك دەرىجىدىن تاشقىرى ئوكسىدنى پارچىلاش 1 (SOD1) ۋە پاركىنسون كېسىلىگە مۇناسىۋەتلىك دېسكاخارازا (PARK7). بىز يەنە نۇرغۇن نۇرغۇن بەلگىلەرنىڭ ، مەسىلەن SMOC1 ۋە مېڭىگە مول پەردىگە قوشۇمچە سىگنال بېرىش ئاقسىلى 1 (BASP1) نىڭ نېرۋا ئاجىزلاش بىلەن بولغان ئالاقىسىنىڭ چەكلىك ئىكەنلىكىنى دەلىللىدۇق. دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، ئۇلارنىڭ CSF ئاقسىلىدا ئومۇمىي مىقدارى تۆۋەن بولغاچقا ، بۇ يۇقىرى ئۈنۈملۈك يەككە ئوقنى تەكشۈرۈش ئۇسۇلىنى ئىشلىتىپ ، MAPT ۋە باشقا AD غا مۇناسىۋەتلىك باشقا ئاقسىللارنى ئىشەنچلىك ھالدا بايقىشىمىز تەس (مەسىلەن NEFL ۋە NRGN) ) (43, 44).
ئاندىن بىز ئۈچ خىل كۆپەيتىش ئانالىزىدا بۇ 60 ئەۋزەللىك تاختىسىنى تەكشۈردۇق. CSF كۆپەيتىلگەن 2 دە ، بىز بىر دانە TMT-MS ئىشلىتىپ ، Emory Goizueta ADRC (17) دىن كەلگەن 297 كونترول ۋە AD ئەۋرىشكىسىنى مۇستەقىل تەھلىل قىلدۇق. CSF كۆپەيتىش 3 بولسا 120 كونتروللۇقتىكى TMT-MS سانلىق مەلۇماتلىرى ۋە شىۋىتسارىيەنىڭ لائۇساندىكى AD بىمارلىرىنىڭ قايتا ئانالىز قىلىنىشىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ (45). بىز ھەر بىر سانلىق مەلۇمات جەدۋىلىدىكى 60 مۇھىم بەلگەنىڭ ئۈچتىن ئىككى قىسمىدىن كۆپرەكىنى بايقىدۇق. گەرچە شىۋىتسارىيە تەتقىقاتىدا ئوخشىمىغان MS سۇپىلىرى ۋە TMT مىقدارلاشتۇرۇش ئۇسۇلى قوللىنىلغان بولسىمۇ (45 ، 46) ، بىز ئىككى قېتىم قايتا تەھلىل قىلىش ئارقىلىق گۇرۇپپا يۈزلىنىشىمىزنى كۈچلۈك كۆپەيتتۇق (5-رەسىم ، C ۋە D ۋە جەدۋەل S2 ، I ۋە J). گۇرۇپپىمىزنىڭ كېسەللىك ئالاھىدىلىكىنى باھالاش ئۈچۈن ، بىز TMT-MS ئارقىلىق تۆتىنچى كۆپەيتىش سانلىق مەلۇمات توپلىمى (CSF كۆپەيتىش 4) نى تەھلىل قىلدۇق ، بۇلار كونترول (n = 18) ۋە AD (n = 17) كېسەللىكلىرىنىلا ئۆز ئىچىگە ئالمايدۇ ، بەلكى PD ( n = 14)), ALS (n = 18) and frontotemporal dementia (FTD) samples (n = 11) (Table S1A). بىز بۇ گۇرۇپپىدىكى ئۈچتىن ئىككى قىسىمغا يېقىن ئاقسىلنى مۇۋەپپەقىيەتلىك ھالدا مىقدارلاشتۇردۇق (60 تىن 38 ى). بۇ نەتىجىلەر بەش خىل بىئولوگىيىلىك ماركا تاختىسىدىكى AD بەلگىلىك ئۆزگىرىشلەرنى گەۋدىلەندۈردى (5E رەسىم ۋە S2K جەدۋەل). مېتابولىت گۇرۇپپىسىنىڭ كۆپىيىشى AD نىڭ ئەڭ كۈچلۈك ئالاھىدىلىكىنى كۆرسىتىپ بەردى ، ئۇنىڭدىن قالسا مېڭە ۋە گىلاس گۇرۇپپىسى. مەلۇم مەنىدىن ئېيتقاندا ، FTD يەنە بۇ تاختىلار ئارىسىدا كۆپەيگەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، بۇ بەلكىم ئوخشاش تورنىڭ ئۆزگىرىشىنى ئەكس ئەتتۈرۈشى مۇمكىن (17). بۇنىڭغا سېلىشتۇرغاندا ، ALS ۋە PD كونترول گۇرۇپپىسى بىلەن ئاساسەن دېگۈدەك يىراقنى كۆرەلمەسلىك ، يەر شارى ۋە مېتابولىزم ئارخىپىنى كۆرسەتتى. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، ئەۋرىشكە تەييارلاش ، MS سۇپىسى ۋە TMT مىقدارلاشتۇرۇش ئۇسۇلىنىڭ ئوخشىماسلىقىغا قارىماي ، بۇ قايتا-قايتا تەھلىللەر شۇنى كۆرسىتىپ بېرىدۇكى ، بىزنىڭ مۇھىم تاختاي بەلگىلىرىمىز 500 دىن ئارتۇق ئۆزگىچە CSF ئەۋرىشكىسىدە AD بىلەن ئالاھىدە ماسلاشقان.
AD نېرۋا ئاجىزلاش بىلىش ئالامەتلىرى كۆرۈلۈشتىن بىر قانچە يىل بۇرۇن كەڭ ئېتىراپ قىلىنغان ، شۇڭا AsymAD نىڭ بىئولوگىيىلىك ماركا بەلگىسى جىددىي ئېھتىياجلىق (5 ، 31). قانداقلا بولمىسۇن ، تېخىمۇ كۆپ پاكىتلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، ئاسىمنىڭ بىئولوگىيىسى ئوخشاش جىسىملاردىن يىراق ، خەتەر ۋە بەرداشلىق بېرىشنىڭ مۇرەككەپ ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى كېيىنكى كېسەللىكلەرنىڭ تەرەققىي قىلىشىدا زور پەرقلەرنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ (47). گەرچە AsymAD كېسەللىكلىرىنى پەرقلەندۈرۈش ئۈچۈن ئىشلىتىلگەن بولسىمۇ ، ئەمما CSF بىئولوگىيىلىك ماركا سەۋىيىسى (Aβ1-42 ، ئومۇمىي تاۋ ۋە p-tau) كىمنىڭ دېۋەڭلىك كېسىلىگە قاراپ تەرەققىي قىلىدىغانلىقىنى ئىشەنچلىك مۆلچەرلىيەلمەيدىغانلىقىنى ئىسپاتلاپ بېرەلمىدى (4 ، 7). چوڭ مېڭىنىڭ فىزىئولوگىيىسىنىڭ كۆپ تەرەپلىرىنى ئاساس قىلغان ئۇنىۋېرسال بىئولوگىيىلىك ماركا قوراللىرىنى ئۆز ئىچىگە ئېلىپ ، بۇ كىشىلەرنىڭ خەتىرىنى توغرا قاتلامغا ئايرىش كېرەك. شۇڭلاشقا ، بىز كېيىن CSF كۆپەيتىلگەن 1 نىڭ AsymAD نوپۇسىدىكى AD دەلىللىگەن بىئولوگىيىلىك ماركا گۇرۇپپىمىزنى ئانالىز قىلدۇق. بۇ 31 خىل AsymAD دېلوسىدا بىنورمال يادرولۇق بىئولوگىيىلىك ماركا سەۋىيىسى (Aβ1–42 / ئومۇمىي تاۋ ELISA نىسبىتى ، <5.5) ۋە تولۇق بىلىش (MoCA ، 27.1 دېگەن مەنىنى بىلدۈرىدۇ) كۆرسىتىلدى. ± 2.2) (جەدۋەل S1A). ئۇنىڭدىن باشقا ، AsymAD كېسىلىگە گىرىپتار بولغانلارنىڭ ھەممىسىنىڭ كلىنىكىلىق دېۋەڭلىك نومۇرى 0 بولۇپ ، كۈندىلىك بىلىش ياكى ئىقتىدار ئىقتىدارىنىڭ تۆۋەنلىگەنلىكى توغرىسىدا ھېچقانداق پاكىت يوقلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
بىز ئالدى بىلەن AsymAD گۇرۇپپىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان 96 CSF كۆپەيتىلگەن 1 نىڭ ھەممىسىدە دەلىللەنگەن تاختىنىڭ دەرىجىسىنى تەھلىل قىلدۇق. بىز AsymAD گۇرۇپپىسىدىكى بىر قانچە گۇرۇپپىنىڭ AD غا ئوخشاش مول ئۆزگىرىشلەرنىڭ بارلىقىنى بايقىدۇق ، قان تومۇر تاختىسى AsymAD دا تۆۋەنلەش يۈزلىنىشىنى كۆرسەتتى ، باشقا بارلىق تاختايلاردا ئۆسۈش يۈزلىنىشى كۆرۈلدى (6A رەسىم). شۇڭلاشقا ، بارلىق گۇرۇپپىلار ELISA Aβ1-42 ۋە ئومۇمىي تاۋ سەۋىيىسى بىلەن ناھايىتى مۇھىم باغلىنىشنى كۆرسەتتى (6B رەسىم). بۇنىڭغا سېلىشتۇرغاندا ، گۇرۇپپا بىلەن MoCA نومۇرى ئوتتۇرىسىدىكى باغلىنىش بىر قەدەر ناچار. بۇ ئانالىزلاردىكى كىشىنى ھەيران قالدۇرىدىغان بايقاشلارنىڭ بىرى ، AsymAD گۇرۇپپىسىدىكى كەڭ دائىرىلىك تاختاي موللىقى. 6A رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، AsymAD گۇرۇپپىسىنىڭ گۇرۇپپا دەرىجىسى ئادەتتە كونترول گۇرۇپپىسى ۋە AD گۇرۇپپىسىنىڭ تاختاي سەۋىيىسىدىن ھالقىپ ، بىر قەدەر يۇقىرى ئۆزگىرىشچانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. AsymAD نىڭ بۇ خىل ئوخشىماسلىقىنى يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەتقىق قىلىش ئۈچۈن ، بىز كۆپ ئۆلچەملىك تارازا (MDS) ئانالىزىنى 96 CSF كۆپەيتىش 1 دېلوسىغا قوللاندۇق. MDS تەھلىلى سانلىق مەلۇماتلار توپلىمىدىكى مەلۇم ئۆزگەرگۈچى مىقدارلارغا ئاساسەن ئەھۋاللارنىڭ ئوخشاشلىقىنى تەسەۋۋۇر قىلىشقا يول قويىدۇ. بۇ گۇرۇپپىلارنى تەھلىل قىلىش ئۈچۈن ، بىز پەقەت CSF بايقاش ۋە كۆپەيتىش 1 ئاقسىل (n = 29) (جەدۋەل S2L) سەۋىيىسىدە ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتلىك ئۆزگىرىش (P <0.05 ، AD / كونترول) بولغان دەلىللەنگەن تاختاي بەلگىسىنى ئىشلىتىمىز. بۇ ئانالىز بىزنىڭ كونتروللۇقىمىز بىلەن AD دېلولىرى ئارىسىدا ئېنىق بوشلۇق توپلاشنى ھاسىل قىلدى (6C رەسىم). بۇنىڭغا سېلىشتۇرغاندا ، بەزى AsymAD دېلولىرى كونترول گۇرۇپپىسىدا ئېنىق توپلانغان ، يەنە بەزىلىرى AD دېلولىرىغا جايلاشقان. بۇ AsymAD ئىرقىي ئايرىمىچىلىقنى تېخىمۇ ئىلگىرى سۈرۈش ئۈچۈن ، بىز MDS خەرىتىمىزنى ئىشلىتىپ ، بۇ AsymAD دېلولىرىنىڭ ئىككى گۇرۇپپىسىنى ئېنىقلىدۇق. بىرىنچى گۇرۇپپىغا كونترولغا يېقىنلاشقان (n = 19) توپلانغان AsymAD دېلولىرى ، ئىككىنچى گۇرۇپپىغا ADM (n = 12) گە يېقىن بەلگە ئارخىپى بولغان AsymAD دېلولىرى يېزىلغان.
(A) CSF بىئولوگىيىلىك ماركا گۇرۇپپىسىنىڭ ئىپادىلەش دەرىجىسى (z- نومۇر) CSF كۆپەيتىش 1 گۇرۇپپىسىدىكى 96 ئەۋرىشكىنىڭ ھەممىسىدە AsymAD نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. تۇكېينىڭ تۈزىتىشتىن كېيىنكى ئوخشىماسلىقىنى ئانالىز قىلىش ئارقىلىق ، گۇرۇپپا مول ئۆزگىرىشلىرىنىڭ ستاتىستىكىلىق ئەھمىيىتىنى باھالاشقا ئىشلىتىلگەن. (2) تاختا ئاقسىلنىڭ موللىق دەرىجىسى (z- نومۇر) نىڭ MoCA نومۇرى ۋە ELISA Aβ1-42 ۋە CSF كۆپەيتىلگەن 1 ئەۋرىشكىسىدىكى ئومۇمىي تاۋ سەۋىيىسىنىڭ باغلىنىشلىق ئانالىزى. Pearson نىڭ مۇناسىۋەتلىك P قىممىتى بىلەن مۇناسىۋەتلىك كوئېففىتسېنتى كۆرسىتىلدى. (C) 96 CSF كۆپەيتىلگەن 1 دېلونىڭ MDS دەلىللەنگەن 29 بەلگە تاختىسىنىڭ موللىق دەرىجىسىنى ئاساس قىلغان بولۇپ ، بايقاش ۋە CSF كۆپەيتىلگەن 1 سانلىق مەلۇمات توپلىمىدا كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرتىلگەن [P <0.05 AD / control (CT)]. بۇ ئانالىز AsymAD گۇرۇپپىسىنى كونترول (n = 19) ۋە AD (n = 12) كىچىك گۇرۇپپىغا ئايرىشقا ئىشلىتىلگەن. (D) يانار تاغ سىيۇژىتى ئىككى AsymAD كىچىك گۇرۇپپىسىنىڭ ئارىسىدىكى -log10 ستاتىستىكىلىق P قىممىتىگە سېلىشتۇرغاندا ، بارلىق CSF كۆپەيتىلگەن 1 ئاقسىلنىڭ log2 ھەسسە ئۆزگىرىشى (x ئوق) بىلەن پەرقلىق ئىپادىسىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. تاختاينىڭ بىئولوگىيىلىك بەلگىسى رەڭلىك. (E) CSF كۆپەيتىش 1 تاللاش گۇرۇپپىسىنىڭ بىئولوگىيىلىك ماركا بەلگىسى AsymAD كىچىك گۇرۇپپىلىرى ئارىسىدا پەرقلىق ئىپادىلىنىدۇ. تۇكېينىڭ ئۆزگىرىشتىن كېيىنكى تەڭشەلگەن ئانالىزى ستاتىستىكىلىق ئەھمىيىتىنى باھالاشقا ئىشلىتىلگەن.
بىز بۇ كونترول بىلەن AD غا ئوخشاش AsymAD قېپىنىڭ پەرقلىق ئاقسىل ئىپادىسىنى تەكشۈردۇق (6D رەسىم ۋە S2L جەدۋەل). ھاسىل بولغان يانار تاغ خەرىتىسىدە كۆرسىتىلىشىچە ، ئىككى گۇرۇپپا ئوتتۇرىسىدا 14 تاختاي بەلگىسى كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرگەن. بۇ بەلگىلەرنىڭ كۆپىنچىسى ماس قەدەم ۋە مېتابولىزىمنىڭ ئەزالىرى. قانداقلا بولمىسۇن ، ئايرىم-ئايرىم ھالدا مېئېلىن ۋە يەر شارى ئىممۇنىتېت گۇرۇپپىسىنىڭ ئەزالىرى بولغان SOD1 ۋە مىرىستويلانغان ئالانېن مول ئاقسىل كىنازا C تارماق ئېلېمېنتى (MARCKS) مۇ بۇ گۇرۇپپىغا تەۋە (6-رەسىم ، D ۋە E). قان تومۇر تاختىسى يەنە AD غا ئوخشاش AsymAD گۇرۇپپىسىدا كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىتىلگەن ئىككى بەلگە تۆھپە قوشقان ، بۇلار AE باغلاش ئاقسىلى 1 (AEBP1) ۋە ئائىلە ئەزالىرى C9 نى تولۇقلايدۇ. ELISA AB1-42 (P = 0.38) ۋە p-tau (P = 0.28) دىكى كونترول بىلەن AD غا ئوخشاش AsymAD كىچىك گۇرۇپپىسىدا كۆرۈنەرلىك پەرق يوق ، ئەمما ئومۇمىي تاۋ سەۋىيىسىدە (P = 0.0031) ھەقىقەتەن كۆرۈنەرلىك پەرق بار. ) (رەسىم. S7). بۇ يەردە بىر قانچە تاختاي بەلگىسى بار بولۇپ ، بۇ ئىككى AsymAD كىچىك گۇرۇپپىسىدىكى ئۆزگىرىشنىڭ ئومۇمىي تاۋ سەۋىيىسىدىن كۆرۈنەرلىك ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (مەسىلەن YWHAZ ، SOD1 ۋە MDH1) (6E رەسىم). ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ نەتىجىلەر بىزنىڭ دەلىللەنگەن گۇرۇپپىمىزدا كېسەللىك ئالامىتى بولمىغان بىمارلارنىڭ كىچىك تىپ ۋە يوشۇرۇن خەتەر دەرىجىسىنى ئايرىيالايدىغان بىئولوگىيىلىك ماركا بولۇشى مۇمكىنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
مىلادىيە ئارقىسىدىكى ھەر خىل كېسەللىك قوزغاتقۇچنى تېخىمۇ ياخشى ئۆلچەش ۋە نىشانلاش ئۈچۈن سىستېمىنى ئاساس قىلغان بىئولوگىيىلىك ماركا قوراللىرىغا جىددىي ئېھتىياج بار. بۇ قوراللار بىزنىڭ AD دىئاگنوز قويۇش رامكىسىنى ئۆزگەرتىپلا قالماي ، يەنە ئۈنۈملۈك ، بىمارلارغا خاس داۋالاش ئىستراتېگىيىسىنىڭ قوللىنىلىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ (1 ، 2). بۇنىڭ ئۈچۈن ، بىز چوڭ مېڭىنى ئاساس قىلغان كېسەللىك قوزغاتقۇچنى ئەكىس ئەتتۈرىدىغان تورنى ئاساس قىلغان CSF بىئولوگىيىلىك بەلگىنى ئېنىقلاش ئۈچۈن AD مېڭىسى ۋە CSF غا تەرەپسىز ئەتراپلىق ئاقسىل ئۇسۇلىنى قوللاندۇق. تەھلىلىمىز بەش خىل CSF بىئولوگىيىلىك ماركا تاختىسى ھاسىل قىلدى ، بۇلار (i) سىناپس ، قان تومۇر ، مېئېلىن ، ئىممۇنىتېت ۋە مېتابولىزم ئىقتىدارىنىڭ ئاجىزلىقىنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ. (2) ئوخشىمىغان MS سۇپىسىدا كۈچلۈك كۆپىيىشچانلىقىنى نامايان قىلىش (3) مىلادىنىڭ دەسلەپكى ۋە ئاخىرقى باسقۇچىدا تەدرىجىي كېسەللىك خاراكتېرلىك ئۆزگىرىشلەرنى كۆرسىتىش. ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ بايقاشلار AD تەتقىقاتى ۋە كلىنىكىلىق قوللىنىشچان پروگراممىلارنىڭ كۆپ خىل ، ئىشەنچلىك ، تورغا يۈزلەنگەن بىئولوگىيىلىك ماركا قوراللىرىنى تەرەققىي قىلدۇرۇشتىكى ئۈمىدلىك بىر قەدەمنى كۆرسىتىدۇ.
بىزنىڭ نەتىجىلىرىمىز AD مېڭە تورىدىكى ئاقسىلنىڭ يۇقىرى دەرىجىدە ساقلانغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ھەمدە ئۇنىڭ سىستېما ئاساسىدىكى بىئولوگىيىلىك ماركا تەرەققىياتىغا لەڭگەر سۈپىتىدە ئىشلىتىلىشىنى قوللايدۇ. تەھلىلىمىزدە AD ۋە AsymAD چوڭ مېڭىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان ئىككى مۇستەقىل TMT-MS سانلىق مەلۇمات جەدۋىلىنىڭ مودۇللىقى كۈچلۈك ئىكەنلىكى كۆرسىتىلدى. بۇ بايقاشلار ئالدىنقى خىزمىتىمىزنى كېڭەيتىپ ، ئالدى ، يان تەرەپ ۋە ۋاقىتلىق پوستلاق قەۋىتىدىكى كۆپ خىل مۇستەقىل گۇرۇپپىلاردىن 2000 دىن ئارتۇق مېڭە توقۇلمىلىرىنىڭ كۈچلۈك مودۇللىرىنىڭ ساقلانغانلىقىنى نامايان قىلدى (17). بۇ ئورتاق تونۇش تورى نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتا كۆرۈلگەن كېسەللىككە مۇناسىۋەتلىك ھەرخىل ئۆزگىرىشلەرنى ئەكىس ئەتتۈرىدۇ ، بۇنىڭ ئىچىدە يەر شارى مول بولغان ياللۇغلىنىش مودۇلىنىڭ كۆپىيىشى ۋە نېرۋا مول مودۇللارنىڭ ئازىيىشى قاتارلىقلار بار. ھازىرقى تەتقىقاتقا ئوخشاش ، بۇ چوڭ كۆلەمدىكى تورمۇ AsymAD دا كۆرۈنەرلىك مودۇللۇق ئۆزگىرىشلەرنى كۆرسىتىپ ، ھەرخىل ئوخشىمىغان كېسەللىك ئالامەتلىرىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (17).
قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ مۇتەئەسسىپ سىستېمىنى ئاساس قىلغان رامكا ئىچىدە تېخىمۇ ئىنچىكە دانچە بىئولوگىيىلىك ئوخشىماسلىق بار ، بولۇپمۇ مىلادىنىڭ دەسلەپكى باسقۇچىدىكى كىشىلەر ئارىسىدا. بىزنىڭ بىئولوگىيىلىك ماركا تاختىسى AsymAD دىكى ئىككى كىچىك گۇرۇپپىنى تەسۋىرلىيەلەيدۇ ، بۇ كۆپ خىل CSF بەلگىسىنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقلىق ئىپادىسىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. گۇرۇپپىمىز بۇ ئىككى گۇرۇپپىنىڭ بىئولوگىيىلىك پەرقىنى گەۋدىلەندۈرەلەيدىغان بولدى ، بۇلار يادرولۇق AD بىئولوگىيىلىك ماركا سەۋىيىسىدە كۆرۈنەرلىك ئەمەس. كونترول گۇرۇپپىسى بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، بۇ AsymAD شەخسلىرىنىڭ Aβ1-42 / ئومۇمىي تاۋ نىسبىتى نورمالسىز ئىدى. قانداقلا بولمىسۇن ، پەقەت AsymAD ئىككى گۇرۇپپىسىدا پەقەت ئومۇمىي تاۋ سەۋىيىسى كۆرۈنەرلىك پەرقلىنەتتى ، Aβ1-42 ۋە p-tau سەۋىيىسى بىر قەدەر سېلىشتۇرما بولۇپ قالدى. يۇقىرى CSF تاۋسى بىلىش ئالامەتلىرىنى Aβ1-42 سەۋىيىسى (7) دىن ياخشىراق ئالدىن پەرەز قىلىدىغاندەك قىلغاچقا ، بىز ئىككى AsymAD گۇرۇپپىسىنىڭ كېسەللىكنىڭ تەرەققىي قىلىش خەۋىپىنىڭ ئوخشىماسلىقى مۇمكىن دەپ گۇمان قىلىمىز. بىزنىڭ AsymAD نىڭ ئەۋرىشكە كۆلىمىنىڭ چەكلىكلىكى ۋە ئۇزۇنغا سوزۇلغان سانلىق مەلۇماتنىڭ كەمچىللىكىنى كۆزدە تۇتۇپ ، ئىشەنچ بىلەن بۇ يەكۈننى چىقىرىش ئۈچۈن يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەتقىقات ئېلىپ بېرىشقا توغرا كېلىدۇ. قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ نەتىجىلەر سىستېمىنى ئاساس قىلغان CSF گۇرۇپپىسىنىڭ كېسەللىكنىڭ ئالامەتسىز باسقۇچىدا شەخسلەرنى ئۈنۈملۈك قاتلامغا ئايرىش ئىقتىدارىمىزنى ئاشۇرالايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بىزنىڭ تەتقىقاتىمىز كۆپ خىل بىئولوگىيىلىك ئىقتىدارلارنىڭ AD نىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسىدىكى رولىنى قوللايدۇ. قانداقلا بولمىسۇن ، تەڭشەلمىگەن ئېنېرگىيە مېتابولىزمى بىزنىڭ بەش دەلىللەنگەن بەلگە تاختىمىزنىڭ كۆزگە كۆرۈنەرلىك تېمىسىغا ئايلاندى. مېتابولىزم ئاقسىلى ، مەسىلەن ، گىپوكسانتىن-گانىن فوسفوروبىلترانسفېرازا 1 (HPRT1) ۋە سۈت كالىسى دېھىدروگېنازا (LDHA) قاتارلىقلار ئەڭ كۈچلۈك دەلىللەنگەن بىرىكمە بىئولوگىيىلىك ماركا بولۇپ ، AD CSF نىڭ كۆپىيىشىنىڭ كۆپىيىشچان جىنسىي مۇناسىۋەت ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. بىزنىڭ قان تومۇرلىرىمىز ۋە گىلاس تاختىلىرىمىزدا ئوكسىدلىنىشقا قارشى ماددىلارنىڭ ماددا ئالمىشىشىغا مۇناسىۋەتلىك بىر قانچە بەلگە بار. بۇ بايقاشلار مېتابولىزىم جەريانىنىڭ پۈتكۈل مېڭىدە ئوينايدىغان ئاچقۇچلۇق رولى بىلەن بىردەك بولۇپ ، نېرۋا ھۈجەيرىلىرىنىڭ يۇقىرى ئېنېرگىيە ئېھتىياجىنى قاندۇرۇپلا قالماي ، يەنە ئاسترونومىيە ۋە باشقا يەر شارى ھۈجەيرىلىرىنىڭ يۇقىرى ئېنېرگىيە ئېھتىياجىنى قاندۇرىدۇ (17 ، 48). بىزنىڭ نەتىجىلىرىمىز قىزىل نۇرنىڭ يوشۇرۇن كۈچىنىڭ ئۆزگىرىشى ۋە ئېنېرگىيە يولىنىڭ ئۈزۈلۈپ قېلىشىنىڭ خوندىرىئوسوملۇق قالايمىقانلىشىش ، يەر شارى خاراكتېرلىك ياللۇغلىنىش ۋە قان تومۇرنىڭ بۇزۇلۇشى قاتارلىق AD نىڭ كېسەللىك پەيدا قىلىشىغا مۇناسىۋەتلىك بىر قانچە ھالقىلىق جەريان ئوتتۇرىسىدىكى يادرولۇق باغلىنىش بولۇشى مۇمكىنلىكىنى ئىسپاتلايدىغان پاكىتلارنى قوللايدۇ. ئۇنىڭدىن باشقا ، مېتابولىزملىق چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى بىئولوگىيىلىك ماركا كونتروللۇقىمىز بىلەن AD غا ئوخشاش AsymAD كىچىك گۇرۇپپىلىرى ئارىسىدا نۇرغۇنلىغان مول بولغان ئاقسىللارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، بۇ كېسەللىكنىڭ دەسلەپكى باسقۇچىدا بۇ ئېنېرگىيە ۋە قىزىل نۇر يولىنى قالايمىقانلاشتۇرۇشى مۇمكىنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
بىز كۆزىتىپ باققان ئوخشىمىغان مېڭە ۋە مېڭە سۇيۇقلۇقى تاختىسىنىڭ يۈزلىنىشىمۇ قىزىقارلىق بىئولوگىيىلىك تەسىرگە ئىگە. نېرۋا ھۈجەيرىسى مول بولغان سىناپس ۋە مېتابولىزم AD مېڭىسىنىڭ سەۋىيىسىنىڭ تۆۋەنلىگەنلىكىنى ۋە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىنىڭ موللىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. نېرۋا ھۈجەيرىلىرىنىڭ ماس قەدەمدە ئېنېرگىيە ھاسىل قىلىدىغان خوندىرىئوسوم موللىقىنى كۆزدە تۇتۇپ ، ئۇلارنىڭ نۇرغۇنلىغان ئالاھىدە سىگناللىرىنى ئېنېرگىيە بىلەن تەمىنلەيدۇ (50) ، بۇ ئىككى نېرۋا گۇرۇپپىسىنىڭ ئىپادىلەش ئارخىپىنىڭ ئوخشاشلىقى مۆلچەرلەنمەكتە. نېرۋا ھۈجەيرىلىرىنىڭ يوقىلىشى ۋە بۇزۇلغان ھۈجەيرىلەرنىڭ ئاجرىلىپ چىقىشى كېيىنكى كېسەللىكلەرنىڭ بۇ مېڭە ۋە CSF گۇرۇپپىسىنىڭ يۈزلىنىشىنى چۈشەندۈرۈپ بېرەلەيدۇ ، ئەمما ئۇلار بىز كۆزىتىۋاتقان دەسلەپكى گۇرۇپپا ئۆزگىرىشىنى چۈشەندۈرۈپ بېرەلمەيدۇ (13). دەسلەپكى ئالامەتسىز كېسەللىكتىكى بۇ بايقاشلارنىڭ بىر خىل چۈشەندۈرۈشى بىنورمال ماس قەدەملىك پۇتاش. چاشقىنەك مودېللىرىدىكى يېڭى پاكىتلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، مىكرو ئورگانىزملىق ماس قەدەملىك فاكوسېتوز مىلادىدا نورمالسىزلىنىپ ، مېڭىدە بالدۇر سىناپ يوقىتىشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى مۇمكىن (51). بۇ تاشلىۋېتىلگەن ماس قەدەملىك ماتېرىيال CSF دا يىغىلىشى مۇمكىن ، شۇڭلاشقا بىز نېرۋا تاختىسىدىكى CSF نىڭ ئېشىشىنى كۆزىتىمىز. ئىممۇنىتېت ۋاسىتىلىك ماس قەدەملىك پۇتاش يەنە كېسەللىك جەريانىدا بىز مېڭىدە ۋە چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىدا كۆزىتىدىغان گىللىق ئاقسىلنىڭ كۆپىيىشىنى قىسمەن چۈشەندۈرۈپ بېرەلەيدۇ. ماس قەدەملىك پۇتاشتىن باشقا ، تاشقى كېسەللىكلەر يولىدىكى ئومۇمىي نورمالسىزلىقمۇ نېرۋا بەلگىسىنىڭ ئوخشىمىغان مېڭە ۋە CSF ئىپادىسىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى مۇمكىن. بىر قاتار تەتقىقاتلار AD مېڭىسىنىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇسىدىكى تاشقى ماددىلارنىڭ تەركىبىدە ئۆزگىرىش بولغانلىقىنى كۆرسەتتى (52). تاشقى ھۈجەيرە يولى Aβ نىڭ كۆپىيىشىگىمۇ چېتىلىدۇ (53 ، 54). دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، تاشقى ئاجرالمىلارنىڭ ئاجرىلىپ چىقىشىنى AD گېنى ئۆزگەرتىلگەن چاشقان مودېلىدىكى AD غا ئوخشاش كېسەللىكنى ئازايتىشى مۇمكىن (55).
شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، قان تومۇردىكى ئاقسىل AD مېڭىسىنىڭ ئوتتۇراھال ئۆسكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بەردى ، ئەمما CSF دا كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىدى. قان-مېڭە توسىقى (BBB) ​​نورمالسىزلىقى بۇ بايقاشلارنى قىسمەن چۈشەندۈرۈپ بېرەلەيدۇ. نۇرغۇنلىغان مۇستەقىل تۇغۇلغاندىن كېيىنكى ئىنسان تەتقىقاتى مىلادىيەدە BBB نىڭ پارچىلىنىدىغانلىقىنى كۆرسەتتى (56 ، 57). بۇ تەتقىقاتلار مېڭە قان تومۇرلىرىنىڭ ئېقىپ كېتىشى ۋە قاندىكى ئاقسىلنىڭ يۈرەك قان تومۇرلىرىنىڭ يىغىلىپ قېلىشىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بالىياتقۇ ئىچكى ھۈجەيرىسىنىڭ بۇ پېچەتلەنگەن قەۋىتىنى چۆرىدىگەن ھەر خىل بىنورمال پائالىيەتلەرنى ئىسپاتلىدى. بۇ چوڭ مېڭىدىكى قان تومۇر ئاقسىلىنىڭ يۇقىرى كۆتۈرۈلۈشىگە ئاددىي چۈشەنچە بېرەلەيدۇ ، ئەمما ئۇ ئوخشاش ئاقسىللارنىڭ چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقىدىكى خورىشىنى تولۇق چۈشەندۈرۈپ بېرەلمەيدۇ. بىر خىل ئېھتىماللىق شۇكى ، مەركىزىي نېرۋا سىستېمىسى ئاكتىپلىق بىلەن بۇ مولېكۇلالارنى ئايرىپ ، ياللۇغلىنىش ۋە ئوكسىدلىنىش سېزىمچانلىقى مەسىلىسىنى ھەل قىلىدۇ. بۇ گۇرۇپپىدىكى بىر قىسىم ئەڭ ئېغىر بولغان CSF ئاقسىلىنىڭ ئازىيىشى ، بولۇپمۇ ياغ ئاقسىلىنى تەڭشەشكە قاتناشقانلار زىيانلىق دەرىجىدىكى ياللۇغنىڭ چەكلىنىشى ۋە ئاكتىپ ئوكسىگېن تۈرىنىڭ نېرۋا ئاجىزلاش جەريانى بىلەن مۇناسىۋەتلىك. Paroxonase 1 (PON1) ئۈچۈن ئېيتقاندا ، قاندىكى ئوكسىدلىنىش سېزىمچانلىقىنى تۆۋەنلىتىشكە مەسئۇل ياغ ئاقسىلى بىرىكتۈرگۈچى ئېنزىم (58 ، 59). Alpha-1-microglobulin / bikunin precursor (AMBP) بولسا قان تومۇر گۇرۇپپىسىنىڭ كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلىتىلگەن بەلگىسى. ئۇ ياغنى توشۇغۇچى بىكۇنىننىڭ ئالدىن بېشارىتى ، ئۇ يەنە ياللۇغنى بېسىش ۋە نېرۋا خاراكتېرلىك قوغداش بىلەنمۇ شۇغۇللىنىدۇ (60 ، 61).
ھەر خىل قىزىقارلىق پەرەزلەرگە قارىماي ، بىئو-خىمىيىلىك كېسەللىك مېخانىزىمىنى بىۋاسىتە بايقىيالماسلىق بايقاش ئارقىلىق قوزغىتىلغان ئاقسىل ئانالىزىنىڭ ھەممىگە ئايان. شۇڭلاشقا ، يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەتقىق قىلىپ ، بۇ بىئولوگىيىلىك ماركا تاختىسىنىڭ ئارقىسىدىكى مېخانىزملارنى ئىشەنچ بىلەن ئېنىقلاش كېرەك. MS نى ئاساس قىلغان كلىنىكىلىق ئانالىزنىڭ تەرەققىياتىغا قاراپ ئىلگىرىلەش ئۈچۈن ، كەلگۈسى يۆنىلىشتە تاللاش ياكى پاراللېل ئىنكاسلارنى نازارەت قىلىش (62) قاتارلىق چوڭ تىپتىكى بىئولوگىيىلىك ماركا تەكشۈرۈشتە نىشانلىق مىقدارلاشتۇرۇش ئۇسۇلىنى قوللىنىشنى تەلەپ قىلىدۇ. بىز يېقىندا پاراللېل ئىنكاسنى نازارەت قىلىش (63) ئارقىلىق بۇ يەردە تەسۋىرلەنگەن نۇرغۇن CSF ئاقسىل ئۆزگىرىشىنى دەلىللىدۇق. YWHAZ ، ALDOA ۋە SMOC1 نى ئۆز ئىچىگە ئالغان بىر قانچە مۇھىم تاختا نىشانلار ئېنىقلىق دەرىجىسى بىلەن مىقدارلاشقان بولۇپ ، بۇلار بىزنىڭ ماس قەدەم ، مېتابولىزم ۋە ياللۇغ تاختىلىرىمىزنىڭ خەرىتىسىنى كۆرسىتىدۇ. مۇستەقىل سانلىق مەلۇماتقا ئېرىشىش (DIA) ۋە MS نى ئاساس قىلغان باشقا ئىستراتېگىيەلەرمۇ نىشان دەلىللەشكە پايدىلىق بولۇشى مۇمكىن. Bud et al. (64) يېقىندا بىزنىڭ CSF بايقاش سانلىق مەلۇمات توپلىمىمىزدا ئېنىقلانغان AD بىئولوگىيىلىك ماركا بىلەن مۇستەقىل DIA-MS سانلىق مەلۇمات توپلىمىدا كۆرۈنەرلىك ئۆز-ئارا باغلىنىش بارلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى ، بۇ ياۋروپادىكى ئوخشىمىغان ئۈچ گۇرۇپپىنىڭ 200 گە يېقىن CSF ئەۋرىشكىسىدىن تەركىب تاپقان. بۇ يېقىنقى تەتقىقاتلار گۇرۇپپىمىزنىڭ ئىشەنچلىك MS ئاساسىدىكى بايقاشقا ئايلىنىش يوشۇرۇن كۈچىنى قوللايدۇ. ئەنئەنىۋى ئانتىتېلا ۋە ئاپتاپپەرەسنى تەكشۈرۈش AD ئاچقۇچلۇق بىئولوگىيىلىك ماركىنىڭ تېخىمۇ تەرەققىي قىلىشى ئۈچۈنمۇ ئىنتايىن مۇھىم. CSF نىڭ موللىقى سەۋەبىدىن ، يۇقىرى ئۈنۈملۈك MS ئۇسۇلى ئارقىلىق بۇ بىئولوگىيىلىك ماركىلارنى بايقاش تېخىمۇ تەس. NEFL ۋە NRGN تۆۋەن مول CSF بىئولوگىيىلىك ماركىنىڭ ئىككى خىل مىسالى بولۇپ ، بۇلار بىزنىڭ ئۇنىۋېرسال تەھلىلىمىزدە گۇرۇپپىغا سىزىلغان ، ئەمما بىزنىڭ يەككە MS ئىستراتېگىيىمىز ئارقىلىق ئىشەنچلىك ھالدا بايقىغىلى بولمايدۇ. PEA قاتارلىق كۆپ خىل ئانتىتېلانى ئاساس قىلغان نىشان ئىستراتېگىيىسى بۇ بەلگىلەرنىڭ كلىنىكىلىق ئۆزگىرىشىنى ئىلگىرى سۈرۈشى مۇمكىن.
ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ تەتقىقات ئوخشىمىغان سىستېمىلارنى ئاساس قىلغان CSF AD بىئولوگىيىلىك ماركىنى پەرقلەندۈرۈش ۋە دەلىللەش ئۈچۈن ئۆزگىچە ئاقسىل ئۇسۇلى بىلەن تەمىنلەيدۇ. قوشۇمچە AD گۇرۇپپىلىرى ۋە MS سۇپىلىرىدا بۇ بەلگە تاختىسىنى ئەلالاشتۇرۇش بەلكىم AD خەتەر دەرىجىسىنى ئايرىش ۋە داۋالاشنى ئىلگىرى سۈرىدىغانلىقىمىزنى ئىسپاتلاپ بېرەلەيدۇ. ۋاقىتنىڭ ئۆتۈشىگە ئەگىشىپ بۇ تاختايلارنىڭ ئۇزۇنلۇق دەرىجىسىنى باھالايدىغان تەتقىقاتلارمۇ قايسى ماركىلارنىڭ بىرىكىشىنىڭ بالدۇر كېسەللىك خەۋىپى ۋە كېسەللىك ئېغىرلىقىنىڭ ئۆزگىرىشىنى ئەڭ ياخشى قاتلامغا ئايرىشنى بەلگىلەشتە ئىنتايىن مۇھىم.
CSF كۆچۈرگەن 3 ئەۋرىشكىنى ھېسابقا ئالمىغاندا ، بۇ تەتقىقاتتا ئىشلىتىلگەن بارلىق CSF ئەۋرىشكىسى Emory ADRC ياكى يېقىن مۇناسىۋەتلىك تەتقىقات ئورگانلىرىنىڭ ھىمايىسىدە توپلانغان. بۇ ئاقسىل تەتقىقاتىدا جەمئىي تۆت يۈرۈش Emory CSF ئەۋرىشكىسى ئىشلىتىلگەن. CSF گۇرۇپپىسىدا 20 ساغلام كونترول قىلىش ۋە 20 AD بىمارلىرىنىڭ ئەۋرىشكىسى بارلىقى بايقالدى. CSF كۆپەيتىلگەن نۇسخىسى 32 ساغلام كونترول قىلىش ئەۋرىشكىسى ، 31 AsymAD شەخىس ۋە مىلادىيە 33 شەخسنىڭ ئەۋرىشكىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. CSF كۆپەيتىلگەن نۇسخىسى 147 كونترول ۋە 150 AD ئەۋرىشكىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. كۆپ خىل كېسەللىك CSF كۆپەيتىش 4 گۇرۇپپىسى 18 كونترول ، مىلادىيە 17 ، 19 ALS ، 13 PD ۋە 11 FTD ئەۋرىشكىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. ئېمورى ئۇنۋېرسىتىتى ئورگان تەكشۈرۈش ھەيئىتى تەستىقلىغان كېلىشىمگە ئاساسەن ، بارلىق ئېمورىي تەتقىقات ئىشتىراكچىلىرىنىڭ ماقۇللۇقىغا ئېرىشتى. 2014-يىللىق دۆلەتلىك ياشانغانلار تەتقىقات ئورنىنىڭ ئالزىمېر مەركىزىنىڭ ئەڭ ياخشى ئەمەلىيەت كۆرسەتمىسى (https://alz.washington.edu/BiospecimenTaskForce.html) غا ئاساسلانغاندا ، چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى بەل ئومۇرتقىسى تېشى ئارقىلىق يىغىۋېلىنىپ ساقلانغان. كونترول ۋە AsymAD ۋە AD بىمارلىرى Emory بىلىش نېرۋا كېسەللىكلىرى ئامبۇلاتورىيەسى ياكى Goizueta ADRC دا ئۆلچەملىك بىلىش باھاسىنى قوبۇل قىلدى. ئۇلارنىڭ چوڭ مېڭە سۇيۇقلۇقى ئەۋرىشكىسى INNO-BIA AlzBio3 Luminex تەرىپىدىن ELISA Aβ1-42 ئۈچۈن تەكشۈرۈلگەن ، ئومۇمىي تاۋ ۋە p-tau ئانالىزى (65). ELISA قىممىتى بېكىتىلگەن AD بىئولوگىيىلىك ماركا كېسىش ئۆلچىمى (66 ، 67) گە ئاساسەن سۇبيېكتلارنىڭ دىئاگنوز قويۇشىنى قوللاشقا ئىشلىتىلىدۇ. باشقا CSF دىئاگنوزى (FTD, ALS ۋە PD) نىڭ ئاساسلىق نوپۇس ۋە دىئاگنوز سانلىق مەلۇماتلىرىمۇ Emory ADRC ياكى مۇناسىۋەتلىك تەتقىقات ئورۇنلىرىدىن ئېلىنغان. بۇ Emory CSF دېلولىرىنىڭ خۇلاسە دېلو ئۇچۇرلىرىنى S1A جەدۋەلدىن تاپقىلى بولىدۇ. شىۋىتسارىيە CSF كۆپەيتىش 3 گۇرۇپپىسىنىڭ ئالاھىدىلىكى ئىلگىرى ئېلان قىلىنغان (45).
CSF ئەۋرىشكىنى تاپتى. بىزنىڭ CSF سانلىق مەلۇمات توپلىمىمىزنى بايقاشنىڭ چوڭقۇرلۇقىنى ئاشۇرۇش ئۈچۈن ، ترىپسىنلاشتۇرۇشتىن ئىلگىرى يۇقىرى مول ئاقسىلنىڭ ئىممۇنىتېت ئىستېمالى ئېلىپ بېرىلدى. قىسقىسى ، 40 يەككە CSF ئەۋرىشكىسىدىن 130 مىللىمېتىرلىق CSF ۋە ئوخشاش مىقداردىكى (130 مىللىمېتىر) يۇقىرى تاللانغان Top14 مول ئاقسىلنىڭ ئاجرىلىپ چىقىشى (تېرمو فىشېر ئىلمىي ، A36372) ئۆينىڭ ئايلانما تۈۋرۈكىگە قويۇلدى (Thermo Fisher Scientific, A89868). temperature Incubate). 15 مىنۇت ئايلانغاندىن كېيىن ، ئەۋرىشكىنى 1000g دىن 2 مىنۇت مەركەزلەشتۈرۈڭ. 3K ئۇلترا بىنەپشە نۇر سۈزگۈچ ئۈسكۈنىسى (Millipore, UFC500396) 14000g لىك مەركەزدىن 30 مىنۇتقىچە مەركەزلەشتۈرۈپ چىقىرىندى. بارلىق ئەۋرىشكە مىقدارىنى فوسفاتلىق بۇففېرلىق تۇز بىلەن 75 مىللىمېتىرغا توغرىلاڭ. ئاقسىلنىڭ قويۇقلۇقى ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ كېلىشىمنامىسى (Thermo Fisher Scientific) غا ئاساسەن ئىككى خىل كىسلاتالىق كىسلاتا (BCA) ئۇسۇلى ئارقىلىق باھالانغان. 40 ئەۋرىشكىنىڭ ھەممىسىدە ئىممۇنىتېتلانغان CSF (60 مىللىمېتىر) لىمىل ئېندوپېپتىزا (LysC) ۋە تىرىپسىن بىلەن ھەزىم قىلىنغان. قىسقىسى ، ئەۋرىشكە 1.2 مىللىمېتىر 0.5 M ترىس -2 (-كاربوكسىئېتىل) -فوسفىن ۋە 3 مىللىمېتىر 0.8 M خلوروئاكېتامىد بىلەن 90 سېلسىيە گرادۇستا 10 مىنۇت تۆۋەنلىتىلىپ ، ئاندىن سۇ مۇنچىسىدا 15 مىنۇت تۇرغۇزۇلدى. ئەۋرىشكە 193 مىللىمېتىر 8 M ئۇرېيە بۇففېر [8 M ئۇرېيە ۋە 100 mM NaHPO4 (pH 8.5)] بىلەن سۇيۇلدۇرۇلۇپ ، ئەڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى 6 M ئۇرېيەگە يەتتى. LysC (4.5 mgg; Wako) ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا بىر كېچە ھەزىم قىلىشقا ئىشلىتىلىدۇ. ئاندىن ئەۋرىشكە 50 MM ئاممىياك ئىككى كاربونات (ABC) بىلەن 1 M ئۇرېيەگە سۇيۇلدى. تەڭ مىقداردا (4.5 mg) تىرىپسىن (Promega) نى قوشۇڭ ، ئاندىن ئەۋرىشكىنى 12 سائەت سىڭدۈرۈڭ. ھەزىم قىلىنغان پېپتىد ئېرىتمىسىنى ئەڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى% 1 لىك فورمات كىسلاتاسى (FA) ۋە% 0.1 لىك ترىفلوئوروئاسسىك كىسلاتا (TFA) (66) گە كىسلاتا قىلىڭ ، ئاندىن يۇقىرىدا بايان قىلىنغاندەك 50 مىللىگىرام Sep-Pak C18 تۈۋرۈكى (سۇ) بىلەن تۇزسىزلاندۇرۇڭ. . ئاندىن پېپتىد% 50 لىك ئاتسېتىنىترىل (ACN) نىڭ 1 مىللىلېتىردا چىقىرىۋېتىلدى. تۈركۈملەپ (25) ئاقسىل مىقدارىنى قېلىپلاشتۇرۇش ئۈچۈن ، 40 CSF ئەۋرىشكىسىنىڭ ھەممىسىدە 100 مىللىمېتىرلىق ئالكوك بىرلەشتۈرۈلۈپ ئارىلاشما ئەۋرىشكە ھاسىل قىلىندى ، ئاندىن بەش يەرشارى ئىچكى ئۆلچىمى (GIS) (48) ئەۋرىشكىسىگە ئايرىلدى. بارلىق يەككە ئەۋرىشكە ۋە بىرلەشتۈرۈلگەن ئۆلچەملەر يۇقىرى سۈرئەتلىك ۋاكۇئۇم (Labconco) تەرىپىدىن قۇرۇتىلىدۇ.
CSF ئەۋرىشكىنى كۆپەيتىدۇ. دەيون ۋە خىزمەتداشلىرى ئىلگىرى CSF كۆپەيتىلگەن 3 ئەۋرىشكىنىڭ ئىممۇنىتېتنىڭ خورىشى ۋە ھەزىم قىلىنىشىنى تەسۋىرلىگەن (45 ، 46). قالغان كۆپەيتىلگەن ئەۋرىشكەلەر ئايرىم ئىممۇنىتېتلانمىغان. بۇ تەسۋىرلەنمىگەن ئەۋرىشكىلەرنى تىرىپسىندا ھەزىم قىلىڭ (17). ھەر قېتىم قايتا-قايتا تەھلىل قىلىش ئۈچۈن ، ھەر بىر ئەۋرىشكىدىن چىقىرىۋېتىلگەن پېپتىدنىڭ 120 مىللىمېتىرلىق ئالكوكلىرى بىرلەشتۈرۈلۈپ ، ئوخشاش ھەجىمدىكى ئالكوكلارغا بۆلۈنۈپ ، TMT بەلگىسى قويۇلغان يەر شارىنىڭ ئىچكى ئۆلچىمى (48). بارلىق يەككە ئەۋرىشكە ۋە بىرلەشتۈرۈلگەن ئۆلچەملەر يۇقىرى سۈرئەتلىك ۋاكۇئۇم (Labconco) تەرىپىدىن قۇرۇتىلىدۇ. تۆۋەن مىقداردىكى CSF ئاقسىلىنىڭ سىگنالىنى يۇقىرى كۆتۈرۈش ئۈچۈن ، ھەر بىر ئەۋرىشكىدىن 125 مىللىمېتىرنى بىرلەشتۈرۈش ئارقىلىق ، ھەر بىر كۆپەيتىلگەن ئانالىز ئۈچۈن «كۈچەيتىلگەن» ئەۋرىشكە تەييارلاندى [يەنى تەتقىقات ئەۋرىشكىسىگە تەقلىد قىلىنغان بىئولوگىيىلىك ئەۋرىشكە ، ئەمما بار مىقدار بار تېخىمۇ چوڭ (37 ، 69)] ئارىلاشتۇرۇلغان CSF ئەۋرىشكىسىگە قوشۇلدى (17). ئاندىن ئارىلاشتۇرۇلغان ئەۋرىشكە 12 مىللىلېتىر يۇقىرى تاللانغان Top14 مول ئاقسىلنى يوقىتىش قالدۇقى (Thermo Fisher Scientific, A36372) ئارقىلىق ئىممۇنىتېت كۈچىدىن يۆتكىلىپ ، يۇقىرىدا بايان قىلىنغاندەك ھەزىم قىلىندى ۋە كېيىنكى بىر نەچچە TMT بەلگىسىگە كىرگۈزۈلدى.